BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)(不交叉兔IgG)：高特异性小鼠IgG检测与信号放大的核心工具

在生物医药研发和基础科研领域，小鼠是最常用的实验动物和抗体生产宿主。羊抗小鼠IgG是检测小鼠源抗体的经典二抗。然而，在涉及兔和小鼠双物种的实验体系中（如小鼠-兔杂交瘤筛选、兔腹水中的小鼠抗体检测、混合样本检测等），普通抗小鼠IgG二抗可能与兔IgG发生交叉反应，导致假阳性结果。本产品为经过交叉吸附处理的山羊抗小鼠IgG(H+L)，不识别兔IgG，是多物种实验体系中高特异性小鼠IgG检测的理想选择。生物素标记进一步结合了生物素-亲和素信号放大系统，可显著提高检测灵敏度。

一、产品概述

项目	参数
产品名称	BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)(不交叉兔IgG)（生物素标记）
宿主来源	山羊
特异性	识别小鼠IgG的重链和轻链（H+L），经交叉吸附处理，不识别兔IgG
标记物	生物素（Biotin）
浓度	以抗体计1mg/mL左右
缓冲液成分	50%甘油、0.01M PBS、0.5%GSA、N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL）
保存条件	-20℃（避光）
有效期	以产品标签为准

二、核心性能

性能指标	参数
流式细胞术/IF/IP	1:200-2000
IHC	1:500-2500
ELISA/Western Blot	1:2000-20000
识别范围	小鼠IgG重链和轻链（H+L）
交叉反应	经吸附处理，不识别兔IgG
信号放大系统	配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用

三、产品特点

1. 高特异性——不交叉兔IgG
   经过严格的交叉吸附处理，本产品不识别兔IgG，确保在兔-小鼠双物种实验体系中无假阳性信号。

2. 生物素标记——信号放大能力强
   生物素-亲和素系统可将信号放大数十倍至上百倍。

3. H+L特异性——双重识别
   识别IgG的重链和轻链，灵敏度更高。

4. 多平台兼容
   适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、IHC、IF、IP等多种检测平台。

四、交叉吸附的意义

特性	说明
标准抗小鼠IgG	可能识别兔IgG（存在种属交叉反应）
本产品	经过兔IgG亲和吸附柱处理，去除了与兔IgG交叉反应的抗体
适用场景	兔-小鼠双物种实验体系，如兔腹水中的小鼠抗体检测、混合样本检测
优势	避免假阳性，结果更可靠

五、主要应用场景

1. 兔-小鼠双物种体系中的小鼠IgG检测（核心应用）

典型场景：

• 兔腹水中表达并纯化的小鼠抗体检测
• 小鼠-兔杂交瘤细胞筛选
• 混合血清样本中特异性检测小鼠IgG（同时存在兔IgG）
• 兔组织/细胞上检测小鼠一抗（IHC/IF）

步骤	操作
1	包被特异性抗原
2	封闭
3	加入含小鼠抗体和兔IgG的混合样品
4	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)(不交叉兔IgG)
5	加入HRP-链霉亲和素
6	加TMB显色

2. 常规ELISA检测（配合HRP-链霉亲和素）

步骤	操作
1	包被特异性抗原
2	封闭
3	加入小鼠血清或小鼠源一抗
4	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)（1:2000-20000稀释）
5	加入HRP-链霉亲和素
6	加TMB显色

3. Western Blot检测

步骤	操作
1	SDS-PAGE电泳、转膜
2	封闭
3	加入小鼠源一抗
4	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)（1:2000-20000稀释）
5	加入HRP-链霉亲和素
6	ECL化学发光检测

预期条带：还原条件下小鼠IgG重链约50-55kDa，轻链约25kDa。

4. 免疫组化（IHC）与免疫荧光（IF）

步骤	操作
1	组织切片/细胞固定、抗原修复
2	封闭
3	加入小鼠源一抗
4	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)（IHC:1:500-2500; IF:1:200-2000）
5	加入HRP-链霉亲和素（IHC）或荧光-链霉亲和素（IF）
6	显色或荧光观察

5. 流式细胞术（配合荧光-链霉亲和素）

步骤	操作
1	细胞固定、透化（如需胞内染色）
2	加入小鼠源一抗
3	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)（1:200-2000稀释）
4	加入荧光标记的链霉亲和素（如SA-FITC、SA-PE）
5	流式细胞仪检测

六、实验操作要点

1. ELISA方案（使用本产品）

步骤	操作	说明
1	包被特异性抗原	4℃过夜
2	封闭	含BSA或脱脂奶粉
3	加入小鼠血清或小鼠源一抗	室温孵育1-2小时
4	洗涤	3-5次
5	加入BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)	1:2000-20000稀释，室温1小时
6	洗涤	3-5次
7	加入HRP-链霉亲和素	按说明书稀释，室温30分钟
8	洗涤	3-5次
9	加TMB显色	15-20分钟
10	终止读数	450nm

2. 稀释度选择建议

实验类型	建议起始稀释度	优化范围
ELISA/WB	1:5000	1:2000-1:20000
流式细胞术	1:500	1:200-1:2000
IHC	1:1000	1:500-1:2500
IF	1:500	1:200-1:2000
IP	1:500	1:200-1:2000

3. 对照设置（关键！验证交叉吸附效果）

对照类型	组成	目的
小鼠IgG阳性对照	小鼠IgG包被或小鼠源一抗	验证检测体系正常工作
兔IgG阴性对照	兔IgG包被或兔源一抗	验证不交叉—应无显著信号
空白对照	无一抗	评估本底
链霉亲和素对照	不加生物素化抗体，只加链霉亲和素	评估链霉亲和素非特异性结合

重要：实验时应同时设置兔IgG阴性对照，确认无交叉反应。

4. 重要操作提示

• 本产品最大的特点是不识别兔IgG，适用于兔-小鼠双物种实验体系。
• 本产品为生物素标记抗体，必须与链霉亲和素（SA）检测系统配合使用，不可直接显色。
• H+L特异性意味着抗体识别IgG的重链和轻链，灵敏度更高。
• 小鼠有多个IgG亚类（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG2c），本产品为总IgG检测，可识别所有亚类。
• 生物素-亲和素系统可显著放大信号，适用于低丰度靶标检测。
• 某些组织（肝、肾）含内源性生物素，可能产生高背景，建议使用生物素封闭试剂盒。
• 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。

七、保存与使用注意事项

项目	说明
保存条件	-20℃避光保存
分装建议	避免反复冻融，建议适当分装后使用
有效期	以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用
环境要求	请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效

八、常见问题

Q1：BIOTIN-山羊抗小鼠IgG(H+L)(不交叉兔IgG)的主要用途是什么？
A1：主要用于ELISA、Western Blot、IHC、IF等实验中小鼠IgG的特异性检测，特别适用于兔和小鼠共存的实验体系（如兔腹水中的小鼠抗体检测、混合样本检测），避免兔IgG的交叉反应干扰。

Q2：“不交叉兔IgG”是什么意思？如何验证？
A2：指本产品经过兔IgG亲和吸附柱处理，去除了与兔IgG交叉反应的抗体。验证方法：以兔IgG包被ELISA板，使用本产品检测，应无显著显色信号。

Q3：什么情况下需要使用本产品？
A3：

实验场景	推荐产品
单纯小鼠样本（无兔IgG）	普通抗小鼠IgG即可
兔与小鼠混合样本	本产品（不交叉）
兔腹水中检测小鼠抗体	本产品（不交叉）
兔组织上检测小鼠一抗（IHC）	本产品（不交叉）

Q4：H+L特异性与Fc特异性有什么区别？
A4：

特性	H+L特异性	Fc特异性
识别区域	重链+轻链	仅Fc片段
灵敏度	更高	中等
适用场景	常规检测、WB（可检测还原后的重轻链）	特定实验

推荐：常规检测优先选择H+L特异性，灵敏度更高。

Q5：如何确定最佳稀释度？
A5：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:500开始倍比稀释至1:40000，选择信噪比最高的稀释度。

Q6：产品如何保存？
A6：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。

Q7：本产品的缓冲液中使用GSA而不是BSA，有什么区别？
A7：GSA（山羊血清白蛋白）作为稳定剂，与山羊源抗体同源，在某些特定检测体系中可进一步降低背景干扰。

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本产品为生物素标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体，经交叉吸附处理，不识别兔IgG，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，特别适用于兔-小鼠双物种实验体系。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。

（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）