小鼠抗猪IgM(μ链特异性)：猪急性感染诊断与IgM捕获的核心单抗工具
在现代养猪业和猪病防控领域，猪是最重要的经济动物之一。IgM是早期免疫应答的标志——它的出现标志着近期感染、疫苗早期应答或免疫激活。在非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）、猪流行性腹泻、猪圆环病毒病、猪瘟等急性、烈性传染病的血清学诊断中，IgM的精准检测是鉴别急性感染与既往感染或疫苗免疫的关键。小鼠抗猪IgM(μ链特异性)单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性，成为ELISA检测和IgM捕获纯化的核心工具。
今天，我们以小鼠抗猪IgM(μ链特异性)单抗为例，为您解析这类产品在猪急性感染诊断与免疫监测中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗猪IgM(μ链特异性) |
| 免疫原/特异性 | 猪IgM μ链，不和猪其它Ig（如IgG）发生结合 |
| 单抗克隆号 | PM-10、PM-26、PM-27 |
| 亚类/轻链 | 均为小鼠IgG1，Kappa轻链 |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7，对应蛋白浓度约5mg/mL，具体以标签标识为准 |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS，pH 7.2，N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃（避光，或-16℃及以下温度） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 仅识别猪IgM μ链，不识别猪IgG等其它Ig |
| 纯度 | ≥90%（以抗体计） |
| 适用平台 | ELISA、免疫亲和层析、Western Blot等 |
| 工作浓度参考 | ELISA：1:2000-1:10000（需自行滴定） |
三、产品特点
-
μ链特异性——精准识别IgM
特异性针对猪IgM的μ重链，不与猪IgG等其他免疫球蛋白交叉反应，确保检测结果的准确性。 -
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得，批间一致性优异，适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度（≥90%）——背景低
以抗体计纯度不低于90%，非特异性吸附少，实验结果更可靠。 -
多种克隆号可选——用途灵活
- PM-10：可用于标记（如HRP标记），也可用于制备亲和柱捕获血清中的猪IgM
- PM-26：可用于包被捕获样品中的猪IgM，也可用于亲和柱制备；标记HRP后配合PM-27包被可进行夹心一步法检测
- PM-27：适合包被捕获样品中的猪IgM
-
夹心一步法检测系统
PM-26标记HRP + PM-27包被，可构建夹心一步法ELISA检测猪血清中的IgM。
四、猪IgM检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 非洲猪瘟（ASF） | IgM阳性提示近期感染，用于早期筛查和疫情监控 |
| 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS，蓝耳病） | 急性期IgM阳性，用于早期诊断 |
| 猪流行性腹泻（PED） | IgM出现提示近期感染，辅助鉴别急性与恢复期 |
| 猪圆环病毒病（PCV2） | 早期IgM应答评估 |
| 猪伪狂犬病（PR） | 急性感染鉴别诊断 |
| 猪瘟（CSF） | IgM阳性提示近期感染，用于早期预警 |
| 疫苗免疫评价 | 免疫后IgM出现，反映疫苗诱导的早期体液应答 |
| 仔猪母源抗体与自身免疫区分 | 早期感染鉴别诊断 |
五、主要应用场景
1. 猪血清总IgM的ELISA定量检测（夹心一步法）
PM-26标记HRP + PM-27包被，可构建夹心一步法检测系统。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被PM-27单抗（捕获抗体） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入猪血清样品 + HRP标记的PM-26（同时加入） |
| 4 | 孵育（一步反应） |
| 5 | 洗涤 |
| 6 | 加TMB显色 |
2. 猪血清中特异性IgM抗体的ELISA检测（间接法）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原（如PRRSV抗原、ASFV抗原） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的猪血清 |
| 4 | 加入小鼠抗猪IgM(μ链特异性)单抗（PM-10/26/27） |
| 5 | 加入HRP标记的抗小鼠IgG二抗 |
| 6 | 加TMB显色 |
3. 免疫亲和柱制备——从猪血清中捕获IgM
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将PM-10或PM-26单抗与CNBr活化的Sepharose（或其它亲和介质）偶联 |
| 2 | 装柱、平衡 |
| 3 | 上样猪血清 |
| 4 | 洗涤去除非特异性结合蛋白 |
| 5 | 低pH缓冲液洗脱纯化的猪IgM |
推荐：PM-10和PM-26均可用于亲和柱制备。
4. 急性感染与既往感染/疫苗免疫的鉴别诊断
| 检测结果 | 判断 |
|---|---|
| IgM阳性、IgG阴性 | 急性感染早期 |
| IgM阳性、IgG阳性 | 急性感染期 |
| IgM阴性、IgG阳性 | 既往感染或疫苗免疫后 |
六、实验操作要点
1. 夹心一步法ELISA方案（PM-26-HRP + PM-27包被）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被PM-27单抗（2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 同时加入：猪血清样品 + HRP标记的PM-26（按预滴定浓度） | 一步反应，室温孵育1小时 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 6 | 终止读数 | 450nm |
2. 间接ELISA方案（检测猪特异性IgM）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加猪血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加小鼠抗猪IgM单抗（如PM-10/26/27） | 建议稀释度：1:2000-1:10000 |
| 5 | 加HRP-抗小鼠IgG二抗 | 按二抗说明书稀释 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
3. 免疫亲和柱制备简要方案
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 推荐克隆号 | PM-10 或 PM-26 |
| 偶联介质 | CNBr活化Sepharose 4B（或等效产品） |
| 偶联条件 | pH 8.3-8.5，室温偶联2小时或4℃过夜 |
| 偶联效率 | 通常可达80-95% |
| 洗脱条件 | 0.1M甘氨酸-HCl，pH 2.5-3.0 |
4. 工作浓度优化建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 间接ELISA（一抗） | 1:2000 | 1:500-1:10000 |
| 夹心ELISA（包被） | 2-10μg/mL | 1-20μg/mL |
| 夹心ELISA（标记） | 1:1000 | 1:500-1:5000 |
5. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知阳性猪血清（感染早期） | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 健康未感染猪血清 | 评估背景 |
| 一抗对照 | 不加小鼠抗猪IgM单抗 | 评估非特异性结合 |
6. 重要操作提示
- 三种克隆号均为μ链特异性，不识别猪IgG
- PM-10：可用于标记和亲和柱制备
- PM-26：可用于包被、亲和柱制备；标记HRP后配合PM-27包被可进行夹心一步法检测
- PM-27：适合包被捕获
- 猪IgM为五聚体结构，分子量大，检测时需注意
- 请使用正确的实验方法，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存（或-16℃及以下温度） |
| 融化避免 | 避免过于反复融化，建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放，请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研，不用于诊断 |
八、常见问题
Q1：三个克隆号（PM-10/26/27）有什么区别？如何选择？
A1：
| 克隆号 | 推荐用途 |
|---|---|
| PM-10 | 可用于标记（如HRP标记）；可用于亲和柱制备捕获猪IgM |
| PM-26 | 可用于包被捕获猪IgM；可用于亲和柱制备；标记HRP后配合PM-27包可进行夹心一步法检测 |
| PM-27 | 适合包被捕获样品中的猪IgM（捕获抗体） |
夹心一步法推荐组合：PM-26标记HRP + PM-27包被。
Q2：本产品能用于检测猪IgG吗？
A2：不能。本品为μ链特异性，不和猪IgG发生结合，仅识别猪IgM。
Q3：本产品可以用于Western Blot吗？
A3：可以。用于检测还原或非还原条件下猪IgM重链（μ链，约75kDa）。
Q4：如何确定最佳工作稀释度？
A4：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:500开始倍比稀释至1:32000（或更高），选择信噪比最高的稀释度。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。如需长期4℃存放，请联系我们定制。
Q6：本产品可以用于开发猪IgM检测试剂盒吗？
A6：可以。三个克隆号均可用于ELISA试剂盒开发：
- 夹心法：PM-27包被 + HRP标记的PM-26检测
- 捕获法：抗IgM单抗包被捕获总IgM，再用特异性抗原和HRP-抗原检测抗体检测特异性IgM
本产品为抗猪IgM μ链特异性单克隆抗体，特异性高、纯度高、批次稳定，已通过多家客户验证，适用于ELISA、免疫亲和层析等免疫检测与纯化实验。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）