小鼠抗人IgG(FC)单克隆抗体：Fc片段检测与人IgG捕获的核心工具
在临床免疫检测和生物医药研发领域，人IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是评估体液免疫、自身抗体及疫苗应答的关键指标。Fc（可结晶片段）特异性抗体识别IgG的Fc片段（重链恒定区），不识别Fab片段，也不识别IgM、IgA、IgE，是Fc受体研究、类风湿因子检测及免疫复合物检测的重要工具。小鼠抗人IgG(FC)单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性，成为人IgG捕获与Fc相关研究的核心工具。
今天，我们以小鼠抗人IgG(FC)单抗（克隆号HG1-3、HG1-11）为例，为您解析这类产品在人IgG检测与科研中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗人IgG(FC) |
| 免疫原/特异性 | 人IgG Fc片段，不识别IgM、IgA、IgE |
| 单抗克隆号 | HG1-3、HG1-11 |
| 亚类/轻链 | HG1-3：小鼠IgM，Kappa轻链；HG1-11：小鼠IgG1，Kappa轻链 |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7，对应蛋白浓度约5mg/mL（具体以标签为准） |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS，pH 7.2，N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃（或-16℃及以下温度） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 识别人IgG Fc片段，不识别IgM、IgA、IgE |
| 纯度 | ≥90% |
| 适用平台 | ELISA、免疫亲和层析、Western Blot、免疫组化（IHC）、流式细胞术等 |
三、克隆号及用途一览
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HG1-3 | 小鼠IgM | 适合包被微孔板或硝酸纤维素膜，捕获人IgG |
| HG1-11 | 小鼠IgG1 | 适合HRP标记，用于检测 |
四、产品特点
-
Fc特异性——精准识别
特异性识别人IgG的Fc片段，不识别IgM、IgA、IgE，确保检测结果的准确性。 -
双克隆可选——用途灵活
- HG1-3（IgM）：IgM分子量大，空间位阻小，适合包被捕获人IgG
- HG1-11（IgG1）：适合HRP标记，用于检测
-
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得，批间一致性优异，适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度（≥90%）——背景低
以抗体计纯度不低于90%，非特异性吸附少，实验结果更可靠。 -
多平台兼容
适用于ELISA、免疫亲和层析、Western Blot、免疫组化（IHC）、流式细胞术等多种检测平台。
五、人IgG Fc检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| Fc受体（FcγR）结合研究 | 研究抗体与FcγRI/II/III的相互作用 |
| 类风湿因子（RF）检测 | RF为抗IgG Fc的自身抗体，需Fc特异抗体 |
| 免疫复合物检测 | 检测循环免疫复合物中的IgG组分 |
| 治疗性单抗检测 | 监测IgG型单抗药物血药浓度 |
| ADCC/CDC研究 | Fc与NK细胞FcγRIIIa结合及补体活化研究 |
| 总IgG捕获与定量 | 从血清或其他样本中捕获纯化人IgG |
六、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测人总IgG（核心应用）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被HG1-3（2-10μg/mL） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清样品（适当稀释） |
| 4 | 加入HRP标记的HG1-11（按优化稀释度使用） |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 免疫亲和层析——捕获纯化人IgG
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HG1-3固定在CNBr活化的琼脂糖微球或硝酸纤维素膜上 |
| 2 | 装柱、平衡 |
| 3 | 上样人血清或含人IgG的样品 |
| 4 | 洗涤去除非特异性结合蛋白 |
| 5 | 低pH缓冲液洗脱纯化的人IgG |
推荐：HG1-3（IgM亚类）适合包被微孔板或硝酸纤维素膜捕获人IgG。
3. 人IgG的Western Blot检测（非还原条件）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | SDS-PAGE电泳（非还原条件）、转膜 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入一抗（人源） |
| 4 | 加入HRP标记的HG1-11（1:2000-10000稀释） |
| 5 | ECL化学发光检测 |
注意：Fc特异性抗体不适用于还原条件的Western Blot（Fc表位被还原破坏）。
4. 免疫组化（IHC）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 组织切片脱蜡、抗原修复 |
| 2 | 封闭Fc受体（使用人IgG） |
| 3 | 加入一抗（人源） |
| 4 | 加入HRP标记的HG1-11（1:500-2500稀释） |
| 5 | DAB显色 |
5. 流式细胞术
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 细胞悬液制备 |
| 2 | 封闭Fc受体（使用人IgG） |
| 3 | 加入一抗（人源） |
| 4 | 加入荧光标记的HG1-11（或HG1-11-荧光） |
| 5 | 流式细胞仪检测 |
七、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案（使用HG1-3包被 + HG1-11-HRP检测）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被HG1-3（2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清样品 | 室温孵育1-2小时，建议稀释1:1000-1:10000 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入HRP标记的HG1-11（工作浓度） | 室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 8 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始浓度/稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 夹心ELISA（包被HG1-3） | 5μg/mL | 2-20μg/mL |
| 夹心ELISA（HG1-11-HRP） | 1:2000 | 1:1000-1:10000 |
| 流式细胞术 | 1:200 | 1:100-1:1000 |
| IHC | 1:200 | 1:100-1:1000 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 纯化人IgG或已知高IgG血清 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 人IgM/IgA/IgE标准品 | 验证Fc特异性—应无显著信号 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
4. 重要操作提示
- Fc特异性：本产品不识别IgM、IgA、IgE，确保检测结果的准确性。
- 双克隆配对：HG1-3（IgM）适合包被捕获；HG1-11（IgG1）适合HRP标记检测。
- Western Blot限制：Fc特异性抗体不适用于还原条件SDS-PAGE的Western Blot（Fc表位被还原破坏）。
- HG1-3的IgM特性：IgM分子量大，空间位阻小，适合包被捕获抗原。
- 二抗选择：HG1-11为小鼠IgG1亚类，如使用未标记形式，选用抗小鼠IgG二抗时需确保识别IgG1亚类。
- 请使用正确的实验方法，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存（或-16℃及以下温度） |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放，请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研，不用于诊断 |
九、常见问题
Q1：小鼠抗人IgG(FC)单抗（HG1-3/HG1-11）的主要用途是什么？
A1：主要用于夹心ELISA检测人总IgG，以及免疫亲和层析捕获纯化人IgG。HG1-3适合包被捕获，HG1-11适合HRP标记检测。适用于Fc受体研究、类风湿因子检测、免疫复合物检测等。
Q2：两个克隆号有什么区别？如何选择？
A2：
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HG1-3 | 小鼠IgM | 包被捕获（微孔板、硝酸纤维素膜） |
| HG1-11 | 小鼠IgG1 | HRP标记（检测抗体） |
经典配对：HG1-3包被 + HG1-11-HRP检测。
Q3：本产品的特异性如何？
A3：本产品特异性识别IgG Fc片段，不识别IgM、IgA、IgE，确保检测结果的准确性。
Q4：HG1-3（IgM亚类）作为包被抗体有什么优势？
A4：IgM分子量大（五聚体），空间位阻小，有利于捕获抗原，提高检测灵敏度。
Q5：如何验证Fc特异性？
A5：
- 分别包被人IgG、IgM、IgA、IgE标准品
- 使用本产品作为一抗进行ELISA检测
- 仅IgG孔应有显著信号，其他孔应无显著信号
Q6：如何确定最佳稀释度？
A6：建议通过预实验进行滴定：包被抗体从1μg/mL开始倍比稀释至20μg/mL，标记抗体从1:500开始倍比稀释至1:10000，选择信噪比最高的稀释度。
Q7：产品如何保存？
A7：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。如需长期4℃存放，请联系我们定制。
本产品为抗人IgG Fc片段特异性单克隆抗体，特异性高、纯度高、批次稳定，已通过多家客户验证，适用于ELISA、免疫亲和层析、IHC、流式细胞术等多种免疫检测实验，是人IgG Fc检测与Fc相关研究的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）