HRP-小鼠抗猪IgG:猪免疫监测与疫病防控的核心酶标工具
在现代养猪业和猪病防控领域,猪是最重要的经济动物之一。猪IgG是适应性免疫应答的主力,其水平变化反映了免疫记忆、感染恢复期、疫苗应答强度以及母源抗体转移情况。在非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)、猪瘟、伪狂犬病等重大疫病的血清学检测和疫苗免疫效果评价中,高特异性的抗猪IgG抗体是实现精准检测的核心工具。HRP标记的小鼠抗猪IgG将酶标记技术与高特异性抗体相结合,是ELISA、Western Blot等检测实验的理想选择。
今天,我们以HRP-小鼠抗猪IgG为例,为您解析这类产品在猪群免疫监测与疫病防控中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | HRP-小鼠抗猪IgG(HRP标记) |
| 宿主来源 | 小鼠 |
| 特异性 | 识别猪IgG |
| 标记物 | HRP(辣根过氧化物酶) |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右(以标记物计2mg/mL左右) |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、Proclin-300 |
| 保存条件 | -20℃(避光) |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA推荐稀释度 | 1:4000-20000 |
| WB推荐稀释度 | 1:4000-12000 |
| IHC推荐稀释度 | 1:500-2500 |
| 稀释性能 | 可稀释到数万倍后仍具有使用价值 |
| 起始工作浓度参考 | 1:5000-1:10000(ELISA) |
| 识别范围 | 猪IgG |
三、产品特点
-
HRP标记——高灵敏度检测
HRP可实现酶催化信号放大,适合低丰度抗体检测。 -
猪IgG特异性——精准识别
适用于猪血清、初乳等样本中猪IgG的检测,特异性识别IgG重链。 -
高稀释倍数——经济耐用
ELISA推荐稀释度1:4000-20000,使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值。 -
多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、免疫组化(IHC)等多种检测平台。
四、猪IgG检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 非洲猪瘟(ASF) | 检测特异性IgG抗体,用于感染溯源和净化评估 |
| 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS,蓝耳病) | IgG水平反映感染恢复期或疫苗免疫状态 |
| 猪流行性腹泻(PED) | 血清学检测,评估感染或免疫史 |
| 猪圆环病毒病(PCV2) | 特异性IgG检测,辅助诊断和免疫评价 |
| 猪瘟(CSF) | 血清学筛查,评估疫苗免疫效果 |
| 猪伪狂犬病(PR) | gE-ELISA鉴别野毒感染与疫苗免疫 |
| 疫苗免疫效果评价 | 免疫后IgG水平反映体液免疫应答强度 |
| 仔猪被动免疫评估 | 仔猪血清中IgG水平反映初乳摄入和母源抗体保护情况 |
五、主要应用场景
1. 间接ELISA检测猪特异性IgG抗体(核心应用)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原(如PRRSV抗原、ASFV抗原) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的猪血清 |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG(1:5000-10000稀释) |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 猪血清总IgG的ELISA定量检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗猪IgG捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入猪血清样品 |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG(1:5000-10000稀释) |
| 5 | 加TMB显色 |
3. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | SDS-PAGE电泳、转膜 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入一抗(猪源) |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG(1:4000-12000稀释) |
| 5 | ECL化学发光检测 |
预期条带:还原条件下猪IgG重链约50-55kDa,轻链约25kDa。
4. 猪群疫苗免疫后抗体动态监测
| 时间点 | 预期结果 |
|---|---|
| 免疫前 | IgG阴性或低水平 |
| 免疫后1-2周 | IgG开始上升 |
| 免疫后3-4周 | IgG达到峰值 |
| 免疫后数月 | IgG维持阳性(记忆应答) |
5. 仔猪被动免疫转移评估
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 采集新生仔猪血清(出生后24-48小时) |
| 2 | 包被抗猪IgG捕获抗体 |
| 3 | 加入仔猪血清样品 |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG(1:5000-10000稀释) |
| 5 | 加TMB显色,定量总IgG |
6. 急性感染与既往感染的鉴别诊断(联合IgM检测)
| 检测结果 | 判断 |
|---|---|
| IgM阳性、IgG阴性 | 急性感染早期 |
| IgM阳性、IgG阳性 | 急性感染期 |
| IgM阴性、IgG阳性 | 既往感染或疫苗免疫后 |
7. 免疫组化(IHC)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 猪组织切片脱蜡、抗原修复 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入一抗(猪源) |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG(1:500-2500稀释) |
| 5 | DAB显色 |
六、实验操作要点
1. 间接ELISA方案(使用本产品)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入猪血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入HRP-小鼠抗猪IgG | 1:5000-10000稀释,室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 8 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| ELISA | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| Western Blot | 1:5000 | 1:2000-1:12000 |
| IHC | 1:1000 | 1:500-1:2500 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知阳性猪血清(免疫后或感染后) | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 健康未免疫猪血清 | 评估背景 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
4. 重要操作提示
- HRP标记:本产品为HRP直接标记,可直接用于ELISA显色,无需使用二抗。
- 猪有多个IgG亚类(IgG1、IgG2a、IgG2b等),本产品为总IgG检测,可识别所有亚类。
- 仔猪被动免疫转移评估建议在出生后24-48小时内采血。
- 非洲猪瘟等重大疫病净化中,IgG检测是重要监测手段。
- 请使用正确的稀释液,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准;有效期过后很长一段时间仍可使用,但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用,以免污染和失效 |
八、常见问题
Q1:HRP-小鼠抗猪IgG的主要用途是什么?
A1:主要用于间接ELISA检测猪血清中特异性IgG抗体,以及Western Blot检测猪IgG。适用于猪传染病血清学检测(非洲猪瘟、蓝耳病、猪瘟等)、疫苗免疫效果评价、仔猪被动免疫评估等。
Q2:本产品与HRP-兔抗猪IgG有什么区别?
A2:
| 特性 | 本产品(小鼠源) | HRP-兔抗猪IgG |
|---|---|---|
| 宿主 | 小鼠 | 兔 |
| 亲和力 | 高 | 通常更高 |
| 适用场景 | 常规检测 | 对灵敏度要求极高的实验 |
Q3:本产品可以用于非洲猪瘟(ASF)的检测吗?
A3:可以。本产品可作为ELISA检测系统中的检测抗体,用于检测猪血清中非洲猪瘟病毒特异性IgG抗体,用于感染溯源和净化评估。
Q4:本产品可以用于伪狂犬病gE-ELISA鉴别诊断吗?
A4:可以。配合gE基因缺失疫苗和gE抗原包被的ELISA板,本产品可用于鉴别野毒感染(gE抗体阳性)与疫苗免疫(gE抗体阴性)猪只。
Q5:如何确定最佳稀释度?
A5:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:1000开始倍比稀释至1:20000,以已知阳性猪血清为阳性对照,选择信噪比最高的稀释度。
Q6:产品如何保存?
A6:请存放于-20℃,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为HRP标记的小鼠抗猪IgG抗体,已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好、背景低,适用于ELISA、Western Blot、IHC等多种免疫检测实验,是猪免疫监测与疫病防控的核心工具。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
