小鼠抗乙肝表面抗原单克隆抗体:HBsAg检测与乙肝诊断的核心工具
在病毒性肝炎诊断和乙肝防控领域,乙型肝炎病毒表面抗原是乙肝感染最重要的血清学标志物,俗称“澳抗”。HBsAg阳性是判断HBV现症感染的核心指标,广泛应用于献血筛查、临床诊断和疫苗免疫效果评价。小鼠抗HBsAg单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性,成为HBsAg检测与乙肝诊断的核心工具。
今天,我们以小鼠抗HBsAg单抗(SB克隆和B63克隆)为例,为您解析这类产品在乙肝诊断与科研中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗乙肝表面抗原 |
| 免疫原/特异性 | 乙型肝炎病毒表面抗原,不识别HBeAg、HBcAg |
| 单抗克隆号 | SB克隆、B63克隆 |
| 亚类/轻链 | SB:小鼠IgM,Kappa轻链;B63:小鼠IgG1,Kappa轻链 |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7,对应蛋白浓度约5mg/mL(具体以标签为准) |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS,pH 7.2,N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL) |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃(或-16℃及以下温度) |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 识别HBsAg,不识别HBeAg、HBcAg |
| 纯度 | ≥90% |
| 亚类及推荐用途 | SB(IgM):适合包被;B63(IgG1):适合HRP标记 |
| 适用平台 | ELISA、化学发光、免疫层析等 |
| 突变株检测 | 不包含突变株结合性,需酌情选择 |
三、产品特点
-
HBsAg特异性——精准识别
特异性识别乙型肝炎病毒表面抗原,不识别HBeAg和HBcAg,确保检测结果的准确性。 -
双克隆设计——包被+标记黄金搭档
- SB克隆(IgM):适合包被于固相载体(ELISA板、磁珠等)
- B63克隆(IgG1):适合HRP标记,作为检测抗体
-
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得,批间一致性优异,适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度(≥90%)——背景低
以抗体计纯度不低于90%,非特异性吸附少,实验结果更可靠。
四、乙肝表面抗原检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 献血筛查 | 检测献血者HBsAg,防止HBV经血传播 |
| 乙肝临床诊断 | HBsAg阳性是HBV现症感染的核心指标 |
| 疫苗免疫效果评价 | 检测免疫后抗-HBs水平(需配合抗-HBs检测体系) |
| 血液制品质控 | 检测血液制品中HBsAg残留 |
| HBV基础研究 | 检测细胞/组织中HBsAg表达 |
| 抗病毒疗效监测 | 监测HBsAg水平变化(HBsAg清除是临床治愈指标) |
五、双克隆配对策略
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 | 优势 |
|---|---|---|---|
| SB克隆 | 小鼠IgM | 包被抗体 | IgM分子量大,空间位阻小,利于抗原捕获 |
| B63克隆 | 小鼠IgG1 | HRP标记检测抗体 | IgG1标记效率高,稳定性好 |
配对建议:SB克隆包被 + B63克隆-HRP检测,构建双抗体夹心ELISA检测HBsAg。
六、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测HBsAg(核心应用)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被SB克隆(2-10μg/mL) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测人血清/血浆样品 |
| 4 | 加入HRP标记的B63克隆(按优化稀释度使用) |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 化学发光检测HBsAg
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被SB克隆 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测样品 |
| 4 | 加入HRP标记的B63克隆 |
| 5 | 加入化学发光底物,读取发光值 |
3. 双抗体夹心ELISA方案(包被SB + B63-HRP检测)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被SB克隆(2-10μg/mL) | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清/血浆样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 4 | 加入HRP标记的B63克隆(工作浓度) | 室温1小时 |
| 5 | 洗涤 | 3-5次 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
4. 工作浓度优化建议
| 组分 | 建议起始浓度/稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| SB克隆(包被) | 5μg/mL | 2-20μg/mL |
| B63克隆-HRP(检测) | 1:2000 | 1:1000-1:10000 |
5. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知HBsAg阳性人血清或HBsAg标准品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | HBsAg阴性人血清 | 评估背景 |
| 特异性对照 | HBeAg/HBcAg阳性血清 | 验证不交叉—应无显著信号 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
6. 重要操作提示
- 双克隆配对:SB克隆(IgM,适合包被)+ B63克隆(IgG1,适合标记)是检测HBsAg的黄金搭档。
- 突变株检测限制:本产品不包含突变株结合性,如需检测HBsAg突变株(如疫苗逃逸突变株),请酌情添加包被抗体和标记抗体,谨慎选择。
- HBsAg存在多种亚型(adr、adw、ayr、ayw等),本产品为广谱识别型。
- HBsAg阳性是HBV现症感染的核心标志,但需结合其他指标全面判断。
- 请使用正确的实验方法,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存(或-16℃及以下温度) |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放,请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研,不用于诊断 |
八、常见问题
Q1:小鼠抗乙肝表面抗原单抗(SB/B63)的主要用途是什么?
A1:主要用于双抗体夹心ELISA或化学发光检测HBsAg。SB克隆适合包被,B63克隆适合HRP标记,两者配合是检测HBsAg的经典配对方案。
Q2:SB克隆和B63克隆有什么区别?如何选择?
A2:
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 | 特点 |
|---|---|---|---|
| SB | 小鼠IgM | 包被抗体 | IgM分子量大,利于抗原捕获 |
| B63 | 小鼠IgG1 | HRP标记检测抗体 | 标记效率高,稳定性好 |
经典配对:SB包被 + B63-HRP检测。
Q3:本产品可以用于检测HBsAg突变株吗?
A3:本产品不包含突变株结合性。如需检测HBsAg突变株(如疫苗逃逸突变株),建议使用针对突变株的特异性抗体,或酌情添加包被抗体和标记抗体,谨慎选择。
Q4:本产品能识别HBeAg或HBcAg吗?
A4:不能。本品特异性识别HBsAg,不识别HBeAg和HBcAg。
Q5:HBsAg检测的临床意义是什么?
A5:
| 检测结果 | 临床意义 |
|---|---|
| HBsAg阳性 | HBV现症感染(急性或慢性) |
| HBsAg阴性、抗-HBs阳性 | 既往感染或疫苗接种后 |
| HBsAg清除 | 临床治愈的重要指标 |
Q6:产品如何保存?
A6:请存放于-20℃,避免反复冻融,建议分装保存。如需长期4℃存放,请联系我们定制。
本产品为抗乙型肝炎病毒表面抗原特异性单克隆抗体,特异性高、纯度高、批次稳定,已通过多家客户验证,SB克隆(IgM,适合包被)和B63克隆(IgG1,适合标记)是HBsAg检测的黄金搭档。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
