在伴侣动物医疗和兽医公共卫生领域，犬是最常见的诊疗对象。狗IgG是适应性免疫应答的主力，其水平变化反映了免疫记忆、感染状态、疫苗应答强度以及母源抗体水平。在犬细小病毒、犬瘟热、犬冠状病毒、犬埃立克体病等传染病的血清学检测和疫苗免疫效果评价中，高特异性的抗狗IgG抗体是实现精准检测的核心工具。生物素标记的兔抗狗IgG(H+L)将生物素-亲和素信号放大系统与高特异性抗体相结合，可显著提高检测灵敏度，是犬类免疫监测与传染病诊断的有力工具。
一、产品概述
|
项目
|
参数
|
|
产品名称
|
BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（生物素标记）
|
|
宿主来源
|
兔
|
|
特异性
|
识别狗IgG的重链和轻链（H+L）
|
|
标记物
|
生物素（Biotin）
|
|
浓度
|
以抗体计1mg/mL左右
|
|
缓冲液成分
|
50%甘油、0.01M PBS、0.5%RSA、N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL）
|
|
保存条件
|
-20℃（避光）
|
|
有效期
|
以产品标签为准
|
二、核心性能
|
性能指标
|
参数
|
|
流式细胞术/IF/IP
|
1:200-2000
|
|
IHC
|
1:500-2500
|
|
ELISA/Western Blot
|
1:2000-20000
|
|
识别范围
|
狗IgG重链和轻链（H+L）
|
|
信号放大系统
|
配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用
|
|
宿主优势
|
兔源抗体亲和力高、背景低
|
三、产品特点
-
狗IgG特异性——精准识别
适用于狗血清、血浆等样本中狗IgG的检测，特异性识别IgG重链和轻链（H+L），灵敏度更高。
-
生物素标记——信号放大能力强
生物素-亲和素系统是目前最灵敏的信号放大系统之一，可将信号放大数十倍至上百倍。
-
高稀释倍数
ELISA/WB推荐稀释度1:2000-20000，经济耐用。
-
多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）等多种检测平台。
四、生物素标记与H+L特异性的优势
|
特性
|
说明
|
|
信号放大
|
一个生物素化抗体可结合多个链霉亲和素-HRP，实现信号级联放大
|
|
灵敏度提升
|
比直接HRP标记抗体灵敏度提高5-20倍
|
|
灵活性
|
同一生物素化抗体可配合不同检测系统（HRP、荧光、胶体金）
|
|
H+L特异性
|
识别重链和轻链，灵敏度更高，特别适用于Western Blot
|
|
兔源优势
|
亲和力高，与狗免疫球蛋白种属差异大，背景低
|
五、狗IgG检测的临床与科研意义
|
应用领域
|
检测意义
|
|
犬细小病毒（CPV）感染
|
检测特异性IgG抗体，评估感染或免疫状态
|
|
犬瘟热（CDV）病毒感染
|
IgG水平反映感染恢复期或疫苗免疫状态
|
|
犬埃立克体病
|
特异性IgG检测，辅助诊断
|
|
犬钩端螺旋体病
|
血清学检测，评估感染或免疫史
|
|
犬冠状病毒
|
IgG阳性提示感染或免疫状态
|
|
狂犬病疫苗免疫评价
|
免疫后IgG水平反映体液免疫应答强度
|
|
幼犬被动免疫评估
|
检测新生幼犬血清中IgG水平，评估初乳摄入情况
|
六、主要应用场景
1. ELISA检测（配合HRP-链霉亲和素）——核心应用
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
包被特异性抗原（如CPV抗原、CDV抗原）
|
|
2
|
封闭
|
|
3
|
加入不同稀释度的狗血清
|
|
4
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（1:2000-20000稀释）
|
|
5
|
加入HRP-链霉亲和素
|
|
6
|
加TMB显色
|
2. 血清总IgG的ELISA定量检测
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
包被抗狗IgG捕获抗体
|
|
2
|
封闭
|
|
3
|
加入狗血清样品
|
|
4
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（1:2000-20000稀释）
|
|
5
|
加入HRP-链霉亲和素
|
|
6
|
加TMB显色
|
3. Western Blot检测
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
SDS-PAGE电泳、转膜
|
|
2
|
封闭
|
|
3
|
加入一抗（狗源）
|
|
4
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（1:2000-20000稀释）
|
|
5
|
加入HRP-链霉亲和素
|
|
6
|
ECL化学发光检测
|
预期条带：还原条件下狗IgG重链约50-55kDa，轻链约25kDa。
4. 犬群疫苗免疫后抗体动态监测
|
时间点
|
预期结果
|
|
免疫前
|
IgG阴性或低水平
|
|
免疫后2-4周
|
IgG开始上升
|
|
免疫后4-6周
|
IgG达到峰值
|
|
免疫后数月
|
IgG维持阳性（记忆应答）
|
5. 幼犬被动免疫转移评估
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
采集新生幼犬血清（出生后24-48小时）
|
|
2
|
定量检测总IgG水平
|
|
3
|
IgG < 2-4 mg/mL提示被动免疫转移不充分
|
6. 免疫组化（IHC）/免疫荧光（IF）
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
狗组织切片/细胞固定、抗原修复
|
|
2
|
封闭
|
|
3
|
加入一抗（狗源）
|
|
4
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（IHC:1:500-2500; IF:1:200-2000）
|
|
5
|
加入HRP-链霉亲和素（IHC）或荧光-链霉亲和素（IF）
|
|
6
|
显色或荧光观察
|
7. 流式细胞术（检测IgG阳性B细胞）
|
步骤
|
操作
|
|
1
|
分离狗外周血单个核细胞（PBMC）
|
|
2
|
封闭Fc受体（使用兔IgG）
|
|
3
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)（1:200-2000稀释）
|
|
4
|
加入荧光标记的链霉亲和素（如SA-FITC、SA-PE）
|
|
5
|
流式细胞仪检测IgG阳性B细胞
|
七、实验操作要点
1. ELISA方案（使用本产品）
|
步骤
|
操作
|
说明
|
|
1
|
包被特异性抗原
|
4℃过夜
|
|
2
|
封闭
|
含BSA或脱脂奶粉
|
|
3
|
加入狗血清样品
|
室温孵育1-2小时
|
|
4
|
洗涤
|
3-5次
|
|
5
|
加入BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)
|
1:2000-20000稀释，室温1小时
|
|
6
|
洗涤
|
3-5次
|
|
7
|
加入HRP-链霉亲和素
|
按说明书稀释，室温30分钟
|
|
8
|
洗涤
|
3-5次
|
|
9
|
加TMB显色
|
15-20分钟
|
|
10
|
终止读数
|
450nm
|
2. 稀释度选择建议
|
实验类型
|
建议起始稀释度
|
优化范围
|
|
ELISA/WB
|
1:5000
|
1:2000-1:20000
|
|
流式细胞术
|
1:500
|
1:200-1:2000
|
|
IHC
|
1:1000
|
1:500-1:2500
|
|
IF
|
1:500
|
1:200-1:2000
|
|
IP
|
1:500
|
1:200-1:2000
|
3. 对照设置
|
对照类型
|
组成
|
目的
|
|
阳性对照
|
已知阳性狗血清（感染后或免疫后）
|
验证检测体系
|
|
阴性对照
|
健康未感染狗血清
|
评估背景
|
|
二抗对照
|
不加一抗，只加BIOTIN-二抗
|
评估非特异性结合
|
|
链霉亲和素对照
|
不加生物素化抗体，只加链霉亲和素
|
评估链霉亲和素非特异性结合
|
4. 重要操作提示
-
本产品为生物素标记抗体，必须与链霉亲和素（SA）检测系统配合使用，不可直接显色。
-
H+L特异性意味着抗体识别IgG的重链和轻链，灵敏度更高，特别适用于Western Blot（可检测还原后分离的重链和轻链）。
-
狗有多个IgG亚类（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4等），本产品为总IgG检测，可识别所有亚类。
-
幼犬被动免疫转移评估建议在出生后24-48小时内采血。
-
狂犬疫苗免疫后的中和抗体检测中，本产品可作为检测抗体使用。
-
生物素-亲和素系统可显著放大信号，适用于低丰度靶标检测。
-
某些组织（肝、肾）含内源性生物素，可能产生高背景，建议使用生物素封闭试剂盒。
-
请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
|
项目
|
说明
|
|
保存条件
|
-20℃避光保存
|
|
分装建议
|
避免反复冻融，建议适当分装后使用
|
|
有效期
|
以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用
|
|
环境要求
|
请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效
|
九、常见问题
Q1：BIOTIN-兔抗狗IgG(H+L)的主要用途是什么？
A1：主要用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、IHC、IF等实验中狗IgG的特异性检测。适用于犬细小病毒、犬瘟热等犬传染病血清学检测、疫苗免疫效果评价、幼犬被动免疫评估等。
Q2：H+L特异性与Fc特异性有什么区别？
A2：
|
特性
|
H+L特异性
|
Fc特异性
|
|
识别区域
|
重链+轻链
|
仅Fc片段
|
|
灵敏度
|
更高
|
中等
|
|
适用场景
|
常规检测、WB（可检测还原后的重轻链）
|
特定实验（如Fc受体研究）
|
推荐：常规检测优先选择H+L特异性，灵敏度更高。
Q3：本产品可以用于犬细小病毒（CPV）的抗体检测吗？
A3：可以。将CPV抗原包被于ELISA板，加入待检狗血清，再用本产品检测，可评估犬只的感染或免疫状态。
Q4：如何确定最佳稀释度？
A4：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:500开始倍比稀释至1:40000，选择信噪比最高的稀释度。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
Q6：本产品的缓冲液中使用RSA而不是BSA，有什么区别？
A6：RSA（兔血清白蛋白）作为稳定剂，与兔源抗体同源，在某些特定检测体系中可进一步降低背景干扰，避免异源蛋白可能带来的交叉反应。
本产品为生物素标记的兔抗狗IgG(H+L)抗体，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、IHC、IF等多种免疫检测实验，是犬类免疫监测与疫病防控的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）
