在珍稀野生动物保护、圈养繁殖和疾病防控领域,大熊猫作为旗舰保护物种,其健康状况监测和疫病防控具有重要意义。IgG是适应性免疫应答的主力,其水平变化反映了免疫记忆、感染状态、疫苗应答强度以及母源抗体转移情况。在大熊猫犬瘟热、大熊猫轮状病毒、大熊猫流感等传染病的血清学检测和疫苗免疫效果评价中,高特异性的抗大熊猫IgG抗体是实现精准检测的核心工具。生物素标记的小鼠抗大熊猫IgG将生物素-亲和素信号放大系统与特异性抗体相结合,可显著提高检测灵敏度,为大熊猫健康监测提供了有力工具。
一、产品概述
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项目
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参数
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产品名称
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BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG(生物素标记)
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宿主来源
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小鼠
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特异性
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识别大熊猫IgG
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标记物
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生物素(Biotin)
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浓度
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以抗体计1mg/mL左右
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缓冲液成分
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50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL)
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保存条件
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-20℃(避光)
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有效期
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以产品标签为准
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二、核心性能
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性能指标
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参数
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流式细胞术/IF/IP
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1:200-2000
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IHC
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1:500-2500
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ELISA/Western Blot
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1:2000-20000
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识别范围
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大熊猫IgG
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信号放大系统
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配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用
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宿主优势
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小鼠源单抗,批间一致性优异
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三、产品特点
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物种特异性——大熊猫IgG检测
专为检测大熊猫IgG设计,适用于大熊猫血清学检测和免疫监测。
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生物素标记——信号放大能力强
生物素-亲和素系统是目前最灵敏的信号放大系统之一,可将信号放大数十倍至上百倍。
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高稀释倍数
ELISA/WB推荐稀释度1:2000-20000,经济耐用。
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多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)等多种检测平台。
四、生物素标记的优势
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特性
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说明
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信号放大
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一个生物素化抗体可结合多个链霉亲和素-HRP,实现信号级联放大
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灵敏度提升
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比直接HRP标记抗体灵敏度提高5-20倍
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灵活性
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同一生物素化抗体可配合不同检测系统(HRP、荧光、胶体金)
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稳定性
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生物素与亲和素的结合是已知最强的非共价相互作用之一
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五、大熊猫IgG检测的保护生物学意义
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应用领域
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检测意义
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大熊猫犬瘟热(CDV)监测
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检测特异性IgG抗体,用于感染筛查和疫苗评价
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大熊猫轮状病毒感染
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IgG阳性提示感染或免疫状态
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大熊猫流感病毒检测
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血清学检测,评估感染史
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疫苗免疫效果评价
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评估免疫后大熊猫的体液免疫应答强度
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圈养大熊猫健康监测
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定期血清学筛查,保障种群健康
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幼崽被动免疫评估
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检测新生大熊猫血清中IgG水平,评估初乳摄入情况
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野化放归前健康评估
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评估放归个体的免疫状态
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六、主要应用场景
1. ELISA检测(配合HRP-链霉亲和素)
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步骤
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操作
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1
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包被特异性抗原(如犬瘟热病毒抗原)
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2
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封闭
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3
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加入不同稀释度的大熊猫血清
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4
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加入BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG(1:2000-20000稀释)
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5
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加入HRP-链霉亲和素
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6
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加TMB显色
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2. Western Blot检测
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步骤
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操作
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1
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SDS-PAGE电泳、转膜
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2
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封闭
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3
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加入一抗(大熊猫源)
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4
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加入BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG(1:2000-20000稀释)
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5
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加入HRP-链霉亲和素
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6
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ECL化学发光检测
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3. 免疫组化(IHC)与免疫荧光(IF)
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步骤
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操作
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1
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大熊猫组织切片/细胞固定、抗原修复
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2
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封闭
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3
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加入一抗(大熊猫源)
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4
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加入BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG(IHC:1:500-2500; IF:1:200-2000)
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5
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加入HRP-链霉亲和素(IHC)或荧光-链霉亲和素(IF)
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6
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显色或荧光观察
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4. 流式细胞术(配合荧光-链霉亲和素)
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步骤
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操作
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1
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大熊猫细胞固定、透化(如需胞内染色)
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2
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加入一抗(大熊猫源)
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3
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加入BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG(1:200-2000稀释)
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4
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加入荧光标记的链霉亲和素(如SA-FITC、SA-PE)
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5
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流式细胞仪检测
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5. 大熊猫疫苗免疫后抗体动态监测
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时间点
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预期结果
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免疫前
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IgG阴性或低水平
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免疫后2-4周
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IgG开始上升
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免疫后4-6周
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IgG达到峰值
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免疫后数月
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IgG维持阳性(记忆应答)
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七、实验操作要点
1. ELISA方案(使用本产品)
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步骤
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操作
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说明
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1
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包被特异性抗原
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4℃过夜
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2
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封闭
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含BSA或脱脂奶粉
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3
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加入大熊猫血清样品
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室温孵育1-2小时
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4
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洗涤
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3-5次
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5
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加入BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG
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1:2000-20000稀释,室温1小时
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6
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洗涤
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3-5次
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7
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加入HRP-链霉亲和素
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按说明书稀释,室温30分钟
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8
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洗涤
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3-5次
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9
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加TMB显色
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15-20分钟
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10
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终止读数
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450nm
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2. 稀释度选择建议
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实验类型
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建议起始稀释度
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优化范围
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ELISA/WB
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1:5000
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1:2000-1:20000
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流式细胞术
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1:500
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1:200-1:2000
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IHC
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1:1000
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1:500-1:2500
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IF
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1:500
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1:200-1:2000
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IP
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1:500
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1:200-1:2000
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3. 对照设置
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对照类型
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组成
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目的
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阳性对照
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已知阳性大熊猫血清(免疫后或感染后)
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验证检测体系
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阴性对照
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健康大熊猫阴性血清
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评估背景
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二抗对照
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不加一抗,只加BIOTIN-二抗
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评估非特异性结合
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链霉亲和素对照
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不加生物素化抗体,只加链霉亲和素
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评估链霉亲和素非特异性结合
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4. 重要操作提示
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本产品为生物素标记抗体,必须与链霉亲和素(SA)检测系统配合使用,不可直接显色。
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大熊猫作为珍稀动物,血清样本量通常较少,建议设计实验时充分考虑样本用量,可采用微量检测体系。
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生物素-亲和素系统可显著放大信号,适用于低丰度靶标检测和微量样本检测。
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某些组织(肝、肾)含内源性生物素,可能产生高背景,建议使用生物素封闭试剂盒。
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请使用正确的稀释液,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
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项目
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说明
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保存条件
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-20℃避光保存
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分装建议
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避免反复冻融,建议适当分装后使用
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有效期
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以产品标签为准;有效期过后很长一段时间仍可使用,但仍建议在有效期内使用
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环境要求
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请不要在脏乱和强光环境中取用,以免污染和失效
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九、常见问题
Q1:BIOTIN-小鼠抗大熊猫IgG的主要用途是什么?
A1:主要用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、IHC、IF等实验中对大熊猫IgG的特异性检测。适用于大熊猫传染病血清学检测、疫苗免疫效果评价、圈养种群健康监测及幼崽被动免疫评估。
Q2:为什么需要专门的大熊猫IgG检测抗体?
A2:大熊猫作为珍稀物种,其免疫球蛋白与常见动物(小鼠、兔、人等)存在较大种属差异,常规抗物种IgG二抗(如抗人IgG、抗小鼠IgG)难以识别大熊猫IgG。因此,需要专门开发抗大熊猫IgG的特异性抗体。
Q3:本产品可以用于检测其他熊科动物(如黑熊、棕熊)的IgG吗?
A3:大熊猫与其他熊科动物(黑熊、棕熊)的亲缘关系较近,可能存在一定程度的交叉反应,但结合效率可能降低。建议使用对应物种的特异性二抗以获得最佳检测效果,或通过预实验验证交叉反应性。
Q4:如何确定最佳稀释度?
A4:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:500开始倍比稀释至1:40000,选择信噪比最高的稀释度。由于大熊猫样本珍贵,可使用已知阳性血清进行优化。
Q5:产品如何保存?
A5:请存放于-20℃,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为生物素标记的小鼠抗大熊猫IgG抗体,已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好、背景低,适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、IHC、IF等多种免疫检测实验,是大熊猫疫病监测与健康评估的有力工具。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)