小鼠抗猪IgG:猪病血清学检测与疫苗评价的核心单抗工具
在生猪养殖和猪病防控领域,猪IgG是适应性免疫应答的主力,其水平变化直接反映了猪只的免疫记忆、感染恢复状态及疫苗应答强度。在非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)、猪瘟、伪狂犬病等重大疫病的抗体监测及疫苗免疫效果评价中,高特异性的抗猪IgG抗体是实现高通量、精准检测的核心工具。小鼠抗猪IgG单克隆抗体以其优异的特异性、高纯度和批次稳定性,成为ELISA等免疫检测的首选。
今天,我们以小鼠抗猪IgG单抗(克隆号 PG-B11)为例,为您解析产品特点及应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗猪IgG |
| 免疫原/特异性 | 猪IgG,不和猪其它Ig(如IgM)发生结合 |
| 单抗克隆号 | PG-B11 |
| 亚类/轻链 | 小鼠IgG1,Kappa轻链 |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7,合蛋白浓度5mg/mL(具体以标签为准) |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS,pH 7.2,N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL) |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃(或-16℃及以下温度) |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 特异性识别猪IgG,不识别猪IgM |
| 纯度 | ≥90% |
| 适用平台 | ELISA、Western Blot、免疫层析等 |
| 特别推荐 | 特别适合标记HRP用于间接ELISA |
三、产品特点
- IgG特异性——精准识别:特异性针对猪IgG,不与猪IgM发生交叉反应,确保检测结果的准确性。
- 单克隆抗体——批次稳定:通过大规模细胞培养法获得,批间差极小,适合标准化试剂盒生产。
- 高纯度(≥90%)——背景低:非特异性吸附少,实验结果更清晰可靠。
- 酶标兼容性优异:该克隆号(PG-B11)特别适合标记HRP,标记后仍保持高活性和高稳定性,是构建间接ELISA检测体系的理想选择。
四、猪IgG检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 疫苗免疫效果评价 | 检测免疫后猪血清中的特异性IgG抗体水平,评估体液免疫应答强度 |
| 感染性疾病诊断 | 检测猪瘟、蓝耳病、伪狂犬等病原体的特异性IgG,判断感染史或恢复期 |
| 疫病净化与监测 | 配合疫苗免疫计划,通过IgG抗体监测区分野毒感染与疫苗免疫 |
| 母源抗体检测 | 检测仔猪血清中的母源IgG水平,指导最佳首免时间 |
| 基础免疫学研究 | 用于研究猪的体液免疫应答机制 |
五、主要应用场景
1. 间接ELISA检测猪血清特异性IgG抗体(核心应用)
这是PG-B11克隆号最擅长的应用场景,特别适合标记HRP后使用。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原(如PRRSV、CSFV、ASFV等病毒抗原或重组蛋白) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的待检猪血清样品 |
| 4 | 加入HRP标记的PG-B11单抗(按优化稀释度使用) |
| 5 | 加TMB显色,读取OD450值 |
2. 双抗体夹心ELISA(检测猪总IgG或特异性抗原)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗猪IgG多抗或另一株单抗(捕获抗体) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入猪血清或标准品 |
| 4 | 加入HRP标记的PG-B11单抗(检测抗体) |
| 5 | 加TMB显色,定量检测猪IgG |
3. Western Blot检测
- 将猪IgG或含有猪IgG的样品进行SDS-PAGE电泳
- 转膜后加入PG-B11单抗作为一抗
- 加入HRP标记的抗小鼠IgG二抗
- ECL化学发光检测
- 还原条件下应在~50kDa(重链)处出现特异性条带
4. 猪疫苗免疫抗体动态监测
| 时间点 | 预期结果 |
|---|---|
| 免疫前 | 特异性IgG阴性或为母源抗体低水平 |
| 首免后2周 | IgG水平开始上升 |
| 二免后2-4周 | IgG水平达到峰值 |
| 免疫后数月 | IgG维持阳性,指示免疫记忆建立 |
六、实验操作要点
1. 间接ELISA方案(使用HRP标记的PG-B11)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原 | 4℃过夜,包被浓度2-10μg/mL |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉,37℃ 1h |
| 3 | 加猪血清样品 | 室温孵育1h,建议从1:100开始倍比稀释 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加HRP标记的PG-B11 | 参考稀释度1:2000-1:10000,室温30-60min |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 室温15-20min |
| 8 | 终止读数 | 2M H2SO4终止,450nm读数 |
2. 工作浓度优化建议
| 实验类型 | 未标记抗体(一抗) | HRP标记抗体(直接检测) |
|---|---|---|
| 间接ELISA | 不适用(标记后使用) | 1:2000-1:10000(需滴定) |
| 夹心ELISA | 2-10μg/mL(包被) | 1:1000-1:5000(检测) |
| Western Blot | 1:1000-1:5000 | - |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知特异性抗体阳性猪血清 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | SPF猪或健康阴性猪血清 | 评估背景 |
| 空白对照 | 仅加稀释液 | 评估本底 |
4. 重要操作提示
- PG-B11克隆号特别适合标记HRP,建议用户直接制备HRP标记 conjugates 用于间接ELISA,可简化实验步骤,降低背景。
- 本产品特异性识别猪IgG的重链,不与猪IgM发生交叉反应。
- 在检测猪血清样本时,建议同时设置阴性对照(健康猪血清)和阳性对照(免疫后/感染后血清)。
- 请使用正确的稀释液,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存(或-16℃及以下温度) |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议根据单次用量分装保存 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放,请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研,不用于诊断 |
八、常见问题
Q1:PG-B11克隆号的主要特点是什么?
A1:该克隆号为小鼠IgG1亚类,Kappa轻链。其最大的特点是特别适合标记HRP用于间接ELISA,标记后抗体仍保持高亲和力和高稳定性,背景低,信号强。
Q2:本产品能用于检测猪IgM吗?
A2:不能。本品特异性针对猪IgG,不和猪IgM发生结合。如需检测猪IgM,请使用抗猪IgM(μ链特异性)抗体。
Q3:本产品可以用于非洲猪瘟(ASF)抗体检测吗?
A3:可以。将本产品标记HRP后,作为检测抗体,可用于ASFV间接ELISA抗体检测试剂盒的研发,检测猪血清中的特异性IgG抗体。
Q4:如何确定最佳工作稀释度?
A4:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:500开始倍比稀释至1:51200,选择信噪比最高的稀释度。用于ELISA时推荐1:2000-1:10000作为起始稀释范围。
Q5:产品如何保存?
A5:请存放于-20℃。避免反复冻融,建议分装保存。如需长期4℃存放,请联系我们定制。
本产品为抗猪IgG特异性单克隆抗体,已通过多家客户验证,特别适合标记HRP用于ELISA检测,灵敏度高、特异性好。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
