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小鼠抗猪IgG:猪病血清学检测与疫苗评价的核心单抗工具

发布时间:2026-05-06 点击数:38

在生猪养殖和猪病防控领域,猪IgG是适应性免疫应答的主力,其水平变化直接反映了猪只的免疫记忆、感染恢复状态及疫苗应答强度。在非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)、猪瘟、伪狂犬病等重大疫病的抗体监测及疫苗免疫效果评价中,高特异性的抗猪IgG抗体是实现高通量、精准检测的核心工具。小鼠抗猪IgG单克隆抗体以其优异的特异性、高纯度和批次稳定性,成为ELISA等免疫检测的首选。

今天,我们以小鼠抗猪IgG单抗(克隆号 PG-B11)为例,为您解析产品特点及应用价值。

一、产品概述

项目 参数
产品名称 小鼠抗猪IgG
免疫原/特异性 猪IgG,不和猪其它Ig(如IgM)发生结合
单抗克隆号 PG-B11
亚类/轻链 小鼠IgG1,Kappa轻链
制备方法 大规模细胞培养法
蛋白浓度 OD280吸光值一般为7,合蛋白浓度5mg/mL(具体以标签为准)
缓冲液成分 0.01M PBS,pH 7.2,N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL)
产品纯度 以抗体计不低于90%
保存条件 -20℃(或-16℃及以下温度)
有效期 以产品标签为准

二、核心性能

性能指标 参数
特异性 特异性识别猪IgG,不识别猪IgM
纯度 ≥90%
适用平台 ELISA、Western Blot、免疫层析等
特别推荐 特别适合标记HRP用于间接ELISA

三、产品特点

  1. IgG特异性——精准识别:特异性针对猪IgG,不与猪IgM发生交叉反应,确保检测结果的准确性。
  2. 单克隆抗体——批次稳定:通过大规模细胞培养法获得,批间差极小,适合标准化试剂盒生产。
  3. 高纯度(≥90%)——背景低:非特异性吸附少,实验结果更清晰可靠。
  4. 酶标兼容性优异:该克隆号(PG-B11)特别适合标记HRP,标记后仍保持高活性和高稳定性,是构建间接ELISA检测体系的理想选择。

四、猪IgG检测的临床与科研意义

应用领域 检测意义
疫苗免疫效果评价 检测免疫后猪血清中的特异性IgG抗体水平,评估体液免疫应答强度
感染性疾病诊断 检测猪瘟、蓝耳病、伪狂犬等病原体的特异性IgG,判断感染史或恢复期
疫病净化与监测 配合疫苗免疫计划,通过IgG抗体监测区分野毒感染与疫苗免疫
母源抗体检测 检测仔猪血清中的母源IgG水平,指导最佳首免时间
基础免疫学研究 用于研究猪的体液免疫应答机制

五、主要应用场景

1. 间接ELISA检测猪血清特异性IgG抗体(核心应用)

这是PG-B11克隆号最擅长的应用场景,特别适合标记HRP后使用。

步骤 操作
1 包被特异性抗原(如PRRSV、CSFV、ASFV等病毒抗原或重组蛋白)
2 封闭
3 加入不同稀释度的待检猪血清样品
4 加入HRP标记的PG-B11单抗(按优化稀释度使用)
5 加TMB显色,读取OD450值

2. 双抗体夹心ELISA(检测猪总IgG或特异性抗原)

步骤 操作
1 包被抗猪IgG多抗或另一株单抗(捕获抗体)
2 封闭
3 加入猪血清或标准品
4 加入HRP标记的PG-B11单抗(检测抗体)
5 加TMB显色,定量检测猪IgG

3. Western Blot检测

  • 将猪IgG或含有猪IgG的样品进行SDS-PAGE电泳
  • 转膜后加入PG-B11单抗作为一抗
  • 加入HRP标记的抗小鼠IgG二抗
  • ECL化学发光检测
  • 还原条件下应在~50kDa(重链)处出现特异性条带

4. 猪疫苗免疫抗体动态监测

时间点 预期结果
免疫前 特异性IgG阴性或为母源抗体低水平
首免后2周 IgG水平开始上升
二免后2-4周 IgG水平达到峰值
免疫后数月 IgG维持阳性,指示免疫记忆建立

六、实验操作要点

1. 间接ELISA方案(使用HRP标记的PG-B11)

步骤 操作 说明
1 包被特异性抗原 4℃过夜,包被浓度2-10μg/mL
2 封闭 含BSA或脱脂奶粉,37℃ 1h
3 加猪血清样品 室温孵育1h,建议从1:100开始倍比稀释
4 洗涤 3-5次
5 加HRP标记的PG-B11 参考稀释度1:2000-1:10000,室温30-60min
6 洗涤 3-5次
7 加TMB显色 室温15-20min
8 终止读数 2M H2SO4终止,450nm读数

2. 工作浓度优化建议

实验类型 未标记抗体(一抗) HRP标记抗体(直接检测)
间接ELISA 不适用(标记后使用) 1:2000-1:10000(需滴定)
夹心ELISA 2-10μg/mL(包被) 1:1000-1:5000(检测)
Western Blot 1:1000-1:5000 -

3. 对照设置

对照类型 组成 目的
阳性对照 已知特异性抗体阳性猪血清 验证检测体系
阴性对照 SPF猪或健康阴性猪血清 评估背景
空白对照 仅加稀释液 评估本底

4. 重要操作提示

  • PG-B11克隆号特别适合标记HRP,建议用户直接制备HRP标记 conjugates 用于间接ELISA,可简化实验步骤,降低背景。
  • 本产品特异性识别猪IgG的重链,不与猪IgM发生交叉反应。
  • 在检测猪血清样本时,建议同时设置阴性对照(健康猪血清)和阳性对照(免疫后/感染后血清)。
  • 请使用正确的稀释液,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。

七、保存与使用注意事项

项目 说明
保存条件 -20℃避光保存(或-16℃及以下温度)
分装建议 避免反复冻融,建议根据单次用量分装保存
长期4℃存放 如需长期4℃存放,请联系我们定制
有效期 以产品标签为准
用途限制 仅用于科研,不用于诊断

八、常见问题

Q1:PG-B11克隆号的主要特点是什么?
A1:该克隆号为小鼠IgG1亚类,Kappa轻链。其最大的特点是特别适合标记HRP用于间接ELISA,标记后抗体仍保持高亲和力和高稳定性,背景低,信号强。

Q2:本产品能用于检测猪IgM吗?
A2:不能。本品特异性针对猪IgG,不和猪IgM发生结合。如需检测猪IgM,请使用抗猪IgM(μ链特异性)抗体。

Q3:本产品可以用于非洲猪瘟(ASF)抗体检测吗?
A3:可以。将本产品标记HRP后,作为检测抗体,可用于ASFV间接ELISA抗体检测试剂盒的研发,检测猪血清中的特异性IgG抗体。

Q4:如何确定最佳工作稀释度?
A4:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:500开始倍比稀释至1:51200,选择信噪比最高的稀释度。用于ELISA时推荐1:2000-1:10000作为起始稀释范围。

Q5:产品如何保存?
A5:请存放于-20℃。避免反复冻融,建议分装保存。如需长期4℃存放,请联系我们定制。


本产品为抗猪IgG特异性单克隆抗体,已通过多家客户验证,特别适合标记HRP用于ELISA检测,灵敏度高、特异性好。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。

(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)



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