HRP-小鼠IgG：小鼠免疫检测与基础科研的核心酶标工具
在免疫学研究和生物医药开发领域，小鼠是最常用的实验动物模型。IgG是适应性免疫应答的主力——它的水平变化反映了免疫记忆、感染恢复期、疫苗应答强度以及抗体类别转换的完成。在基因工程小鼠表型分析、病毒感染模型、自身免疫病研究、疫苗评价以及单克隆抗体开发中，HRP标记的抗小鼠IgG抗体是实现高通量、高灵敏度检测的二抗核心工具。
今天，我们以HRP-小鼠IgG为例，为您解析这类产品在小鼠模型免疫监测与基础科研中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | HRP-小鼠IgG |
| 宿主 | 小鼠 |
| 标记物 | HRP（辣根过氧化物酶） |
| 浓度 | 2mg/mL左右 |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、Proclin-300 |
| 保存条件 | -20℃（避光） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA/WB推荐稀释度 | 1:4000-12000 |
| 稀释性能 | 可稀释到数万倍后仍具有使用价值 |
| 起始工作浓度参考 | 1:5000-1:8000（ELISA） |
三、产品特点
-
HRP标记——高灵敏度检测
HRP可实现酶催化信号放大，适合各种免疫检测实验。 -
小鼠IgG特异性——精准识别
适用于小鼠血清、细胞培养上清等样本中小鼠IgG的检测，特异性识别IgG重链。 -
高稀释倍数——经济耐用
推荐稀释度1:4000-12000，使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值。 -
多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、ELISpot、免疫组化、流式细胞术等多种检测平台。
四、小鼠IgG检测的科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 基因工程小鼠表型分析 | 检测特定抗原刺激后的IgG应答水平 |
| 病毒感染模型研究 | IgG水平反映感染恢复期或疫苗免疫状态 |
| 自身免疫病研究 | 检测自身抗体IgG水平（如狼疮、关节炎模型） |
| 疫苗免疫评价 | 免疫后IgG水平反映体液免疫应答强度 |
| 单克隆抗体开发 | 筛选IgG型杂交瘤细胞 |
| 抗体类别转换研究 | 追踪免疫后IgM向IgG的转换过程 |
| 免疫时间动力学研究 | 追踪免疫后不同时间点的IgG应答 |
五、主要应用场景
1. 小鼠血清中特异性IgG抗体的ELISA检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原（如病毒抗原、蛋白抗原） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的小鼠血清 |
| 4 | 加HRP-小鼠IgG（1:5000-8000稀释） |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 小鼠血清总IgG的ELISA定量检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗小鼠IgG捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加小鼠血清样品 |
| 4 | 加HRP-小鼠IgG（1:5000-8000稀释） |
| 5 | 加TMB显色 |
3. Western Blot检测
- 将待测样品进行SDS-PAGE电泳
- 转膜后加一抗（小鼠来源）
- 加HRP-小鼠IgG（1:5000-8000稀释）作为二抗
- ECL化学发光检测
4. 小鼠免疫后抗体动态监测
| 时间点 | 预期结果 |
|---|---|
| 免疫前 | IgG阴性或低水平 |
| 免疫后1周 | IgG开始上升 |
| 免疫后2-4周 | IgG达到峰值 |
| 免疫后数月 | IgG维持阳性（记忆应答） |
5. 急性感染与既往感染的鉴别诊断（联合IgM检测）
| 检测结果 | 判断 |
|---|---|
| IgM阳性、IgG阴性 | 急性感染早期 |
| IgM阳性、IgG阳性 | 急性感染期 |
| IgM阴性、IgG阳性 | 既往感染或免疫后 |
6. 小鼠IgG型杂交瘤细胞筛选
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗小鼠IgG捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入杂交瘤培养上清 |
| 4 | 加HRP-小鼠IgG（1:5000-8000稀释） |
| 5 | 加TMB显色，筛选阳性克隆 |
六、实验操作要点
1. ELISA方案
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被捕获抗体/抗原 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加小鼠血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加HRP-小鼠IgG | 1:5000-8000稀释 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 6 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释液选择
| 推荐稀释液 | 说明 |
|---|---|
| 含0.2% BSA（不含免疫球蛋白）和0.05%吐温-20的0.01M PBS（pH 7.0） | 首选 |
重要提示：稀释液中不能含有免疫球蛋白，以免干扰检测。配成的工作液建议一次使用完；若需长期存放、多次使用，请添加合适的稳定剂（可联系购买）。
3. 小鼠血清样品稀释建议
| 检测目的 | 建议稀释度 |
|---|---|
| 特异性抗体检测 | 1:100-1:1000 |
| 总IgG定量 | 1:10000-1:100000 |
4. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知阳性小鼠血清（免疫后） | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 健康未免疫小鼠血清 | 评估背景 |
| 二抗对照 | 不加一抗，只加HRP-小鼠IgG | 评估非特异性结合 |
5. 重要操作提示
- 小鼠有多个IgG亚类（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG2c等），本产品为总IgG检测，识别所有亚类
- 如需特异性检测某一亚类，请使用对应亚类的特异性二抗
- 免疫时间动力学研究中，建议同时检测IgM和IgG，观察抗体类别转换
- 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效 |
八、常见问题
Q1：HRP-小鼠IgG能用于检测哪些样本？
A1：适用于小鼠血清、血浆、杂交瘤上清等样本中小鼠IgG的检测。
Q2：本产品能识别小鼠IgG的所有亚类吗？
A2：是的。本产品为抗小鼠IgG总抗体，可识别IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG2c等所有亚类。
Q3：本产品与HRP-小鼠IgM有什么区别？
A3：HRP-小鼠IgG检测IgG（免疫记忆、既往感染、疫苗应答），HRP-小鼠IgM检测IgM（急性感染早期标志）。两者联合使用可区分急性感染与既往感染，及评价抗体类别转换。
Q4：如何确定最佳稀释度？
A4：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:2000开始倍比稀释至1:32000，选择信噪比最高的稀释度。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
Q6：本产品可以用于ELISpot实验吗？
A6：可以。本产品可作为检测抗体用于小鼠IgG的ELISpot检测，评价分泌IgG的浆细胞数量。
Q7：本产品可以用于免疫组化（IHC）吗？
A7：可以。建议在预实验中优化稀释度，通常IHC中HRP标记抗体的工作浓度高于ELISA，可从1:200-1:1000开始摸索。
本产品已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好，适用于ELISA、Western Blot等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）