小鼠IgG蛋白标准品：基础免疫研究的核心工具
在小鼠模型研究中，IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是体液免疫的核心标志物。无论是基因工程小鼠的免疫表型分析、疫苗免疫效果评价，还是自身免疫病模型研究，小鼠IgG的精准检测都是核心环节。高纯度的小鼠IgG蛋白标准品，是建立定量检测方法、验证检测体系可靠性的核心工具。
今天，我们以小鼠IgG为例，为您解析这类产品在基础免疫研究中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠IgG |
| 来源 | 小鼠血清 |
| 制备方法 | 亲和提取 |
| 蛋白浓度 | 10mg/mL |
| 产品纯度 | ≥90% |
| 分子量 | 约150kDa |
| 规格 | 1mg/支 |
| 保存条件 | -20℃ |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 纯度 | ≥90% |
| 适用平台 | ELISA、WB、IHC、ICA |
| 其他用途 | 可直接用于动物免疫制备抗体 |
三、产品特点
1. 高纯度——结果更可靠
亲和提取，纯度不低于90%，确保检测结果的准确性。
2. 高浓度——10mg/mL
高浓度设计，可作为标准品母液，满足不同稀释倍数需求。
3. 多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、IHC、ICA等多种检测平台。
4. 可作为免疫原
可直接用于动物免疫，制备抗小鼠IgG抗体。
四、小鼠IgG的临床与研究意义
| 应用领域 | 价值 |
|---|---|
| 基因工程小鼠 | 敲除/转基因小鼠免疫表型分析 |
| 疫苗免疫评价 | 候选疫苗免疫原性检测 |
| 自身免疫病模型 | EAE、CIA模型抗体检测 |
| 肿瘤免疫 | PD-1/PD-L1药效评价 |
| 抗体药物 | 人源化小鼠抗药抗体（ADA）检测 |
小鼠IgG正常血清水平：约5-15 mg/mL（因品系和年龄而异）
五、小鼠IgG亚类简介
| 亚类 | 血清含量（占IgG%） | 主要功能 | 免疫应答类型 |
|---|---|---|---|
| IgG1 | 40-60% | 抗蛋白抗原 | Th2型 |
| IgG2a | 20-30% | 抗病毒、补体激活 | Th1型 |
| IgG2b | 10-20% | 调理吞噬 | 混合型 |
| IgG3 | 5-10% | 抗多糖抗原 | T细胞非依赖性 |
本产品为总IgG，包含所有亚类。
六、主要应用场景
1. 小鼠血清总IgG的ELISA定量检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗小鼠IgG捕获抗体（如山羊抗小鼠IgG） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加小鼠IgG标准品和待测样品 |
| 4 | 加HRP-抗小鼠IgG检测抗体 |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 小鼠血清中特异性抗体的ELISA检测
- 包被特异性抗原
- 加入不同稀释度的小鼠血清
- 加HRP-抗小鼠IgG检测抗体
- 加TMB显色
3. 抗小鼠IgG抗体的特异性验证
- 包被小鼠IgG、大鼠IgG等标准品
- 加待验证的抗小鼠IgG抗体
- 加相应二抗检测
- 仅小鼠IgG孔应显色
4. Western Blot中的阳性对照
- 将小鼠IgG标准品进行SDS-PAGE电泳
- 转膜后加抗小鼠IgG抗体检测
- 还原条件下应在~50kDa（重链）和~25kDa（轻链）处出现条带
5. 直接用于动物免疫制备抗体
- 小鼠IgG与弗氏佐剂乳化
- 免疫兔子、山羊或小鼠
- 获得抗小鼠IgG抗血清
6. 杂交瘤筛选中的应用
- 作为标准品，定量检测杂交瘤上清中的抗体浓度
- 评估抗体产量
七、实验操作要点
1. 小鼠血清总IgG定量ELISA方案
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗小鼠IgG捕获抗体 | 2-5μg/mL，4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加小鼠IgG标准品梯度稀释 | 1:1000-100000稀释 |
| 4 | 加HRP-抗小鼠IgG检测抗体 | 按推荐稀释度 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 6 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度优化
| 实验平台 | 推荐稀释范围 | 常用起始稀释度 |
|---|---|---|
| ELISA标准品 | 1:1000-100000 | 1:5000 |
| WB阳性对照 | 1:500-5000 | 1:1000 |
| 动物免疫 | 不稀释 | 直接使用 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 小鼠IgG标准品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 不含IgG的缓冲液 | 评估背景 |
| 交叉反应对照 | 大鼠IgG等 | 验证抗体特异性 |
4. 重要操作提示
- 小鼠与大鼠同属啮齿类，IgG同源性较高，抗小鼠IgG抗体可能与大鼠IgG存在交叉反应
- 在涉及大鼠样本的检测中，建议设置交叉反应对照
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃保存，避光 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议分装保存 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
九、常见问题
Q1：小鼠IgG与大鼠IgG有什么区别？
A1：
| 特征 | 小鼠IgG | 大鼠IgG |
|---|---|---|
| 来源 | 小鼠血清 | 大鼠血清 |
| 同源性 | 与大鼠IgG约85%同源 | 与小鼠IgG约85%同源 |
| 检测特异性 | 抗小鼠IgG抗体可能与大鼠IgG交叉 | 抗大鼠IgG抗体可能与小鼠IgG交叉 |
Q2：本产品能否用于总IgG定量检测？
A2：可以。作为总IgG标准品，包含所有IgG亚类（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3），适用于总IgG定量。
Q3：在Western Blot中，小鼠IgG的条带位置在哪里？
A3：
- 还原条件（DTT或β-巯基乙醇）：重链~50kDa，轻链~25kDa
- 非还原条件：完整IgG~150kDa
Q4：如何确定最佳稀释度？
A4：建议通过预实验进行滴定：将小鼠IgG标准品从1:500开始倍比稀释至1:256000，选择标准曲线线性最佳的稀释范围。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于**-20℃**保存，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品已通过亲和提取纯化，纯度≥90%，适用于ELISA、Western Blot等免疫检测实验，也可直接用于动物免疫制备抗体。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）