小鼠抗牛IgG单克隆抗体(BG-13):牛病诊断与反刍动物免疫研究的精准工具
在反刍动物养殖和兽医诊断领域,牛是最重要的经济动物之一。从口蹄疫、牛病毒性腹泻到牛结核病等重大疫病的血清学检测,从疫苗免疫效果评价到初乳质量评估,牛IgG的精准检测是核心环节。单克隆抗体以其高特异性、批间一致的独特优势,成为牛病诊断和免疫研究的理想工具。
今天,我们以小鼠抗牛IgG单克隆抗体(克隆号BG-13)为例,为您解析这类产品在牛源免疫检测中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗牛IgG |
| 克隆号 | BG-13 |
| 宿主 | 小鼠 |
| 亚类 | IgG2a,Kappa轻链 |
| 特异性 | 识别牛IgG,不与牛IgM结合 |
| 蛋白浓度 | 约5mg/mL(OD280=7) |
| 产品纯度 | ≥90% |
| 规格 | 1mg/支 |
| 保存条件 | -20℃ |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA推荐稀释度 | 1:1000-5000 |
| WB推荐稀释度 | 1:500-2000 |
| IHC推荐稀释度 | 1:200-1000 |
| 流式细胞术推荐稀释度 | 1:200-1000 |
| 起始工作浓度 | 1:2000(ELISA) |
三、产品特点
1. 单克隆抗体——批间一致性好
通过大规模细胞培养法生产,确保不同批次间性能一致,适合试剂盒工业化生产。
2. 高特异性——不与牛IgM交叉
本品经过严格特异性验证,不与牛IgM发生结合,确保检测结果真实反映IgG水平。
3. 小鼠IgG2a亚类,Kappa轻链
亚类明确,便于与二抗系统配合使用。
4. 多种标记兼容
可用作标记HRP、胶体金、荧光素或荧光微球,或者包被微孔板以及纤维素膜来捕获牛IgG。
5. 高纯度——背景更干净
亲和纯化,抗体纯度≥90%。
四、主要应用场景
1. 牛血清总IgG的ELISA定量检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗牛IgG捕获抗体(多克隆) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加牛血清标准品和待测样品 |
| 4 | 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13) |
| 5 | 加HRP-抗小鼠IgG二抗 |
| 6 | 加TMB显色 |
2. 牛疫苗免疫后的抗体效价检测
- 包被疫苗抗原
- 加入不同稀释度的牛血清
- 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13)
- 加HRP-抗小鼠IgG二抗检测
3. 牛血清中特异性抗体的Western Blot验证
- 抗原蛋白SDS-PAGE、转膜
- 加牛血清孵育
- 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13)
- 加HRP-抗小鼠IgG二抗
- ECL化学发光检测
4. 牛组织切片的IgG免疫组化染色
- 组织切片脱蜡、抗原修复
- 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13)
- 加HRP-抗小鼠IgG二抗
- DAB显色
5. 初乳中IgG含量的检测
- 稀释初乳样品
- 用小鼠抗牛IgG单抗进行ELISA检测
- 评估初乳质量,指导犊牛饲喂
6. 牛B细胞表面IgG的流式检测
- 分离牛PBMC
- 封闭Fc受体
- 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13)
- 加FITC-抗小鼠IgG二抗
- 流式细胞仪检测
五、实验操作要点
1. ELISA方案
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗原/捕获抗体 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加牛血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加小鼠抗牛IgG单抗(BG-13) | 1:2000稀释,室温1小时 |
| 5 | 加HRP-抗小鼠IgG二抗 | 按推荐稀释度 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
2. 标记应用方案
| 标记物 | 应用平台 | 说明 |
|---|---|---|
| HRP | ELISA、WB | 酶催化显色/发光 |
| 胶体金 | 免疫层析试纸条 | 快速检测 |
| 荧光素/FITC | 流式细胞术、免疫荧光 | 直接荧光检测 |
| 荧光微球 | 免疫层析定量检测 | 荧光分析仪读数 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知阳性牛血清 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 未免疫牛血清 | 评估背景 |
| 同型对照 | 小鼠IgG2a同型抗体 | 评估非特异性染色 |
| 特异性对照 | 牛IgM包被孔 | 验证与IgM无交叉 |
4. 重要操作提示
- 初乳中IgG含量极高(可达50-100mg/mL),需大幅度稀释后检测
- 流式细胞术检测B细胞表面IgG时,需使用Fc受体阻断剂
六、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃保存,避光 |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议分装保存 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
七、常见问题
Q1:克隆号BG-13有什么特点?
A1:BG-13为小鼠IgG2a亚类,Kappa轻链,经过严格特异性验证,不与牛IgM发生结合。
Q2:单克隆抗体与多克隆抗体相比,有什么优势?
A2:
- 特异性更高:识别单一表位,避免交叉反应
- 批间一致:细胞培养生产,无限批次完全一致
- 背景更低:非特异性结合远低于多抗
- 供应稳定:无需免疫动物,不受个体差异影响
Q3:本品与牛IgM有交叉反应吗?
A3:没有。本品经过严格特异性验证,不与牛IgM发生结合。这在需要区分IgG和IgM的实验中尤为重要。
Q4:能否用于检测初乳中的IgG含量?
A4:可以。初乳中IgG含量极高(可达50-100mg/mL),需大幅度稀释(1:10000以上)后检测。
Q5:本品可用于哪些标记?
A5:可用作标记HRP、胶体金、荧光素或荧光微球,或者包被微孔板以及纤维素膜来捕获牛IgG。
Q6:抗体如何保存?
A6:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品已通过大规模细胞培养法生产,批间一致性好,适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术、免疫层析等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
