小鼠抗人CRP单克隆抗体(crp-5/crp-11):炎症标志物检测的精准单抗工具
在临床检验和生物医学研究中,C反应蛋白(CRP)是最重要的炎症标志物之一。作为急性时相反应蛋白,CRP在感染、炎症、组织损伤时迅速升高,是诊断细菌感染、评估心血管疾病风险、监测炎症性疾病活动的核心指标。单克隆抗体以其高特异性、批间一致的优势,成为CRP检测试剂开发的首选原料。
今天,我们以小鼠抗人CRP单克隆抗体(克隆号crp-5/crp-11)为例,为您解析这类产品在CRP检测中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗人CRP |
| 宿主 | 小鼠 |
| 克隆号 | crp-5、crp-11 |
| 亚类 | 均为IgG1,Kappa轻链 |
| 特异性 | 识别人CRP,不与其它His Tag蛋白结合 |
| 蛋白浓度 | 约5mg/mL(OD280=7) |
| 产品纯度 | ≥90% |
| 规格 | 1mg/支 |
| 保存条件 | -20℃ |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA推荐稀释度 | 1:1000-5000 |
| WB推荐稀释度 | 1:500-2000 |
| 免疫层析推荐稀释度 | 1:500-2000 |
| 起始工作浓度 | 1:2000(ELISA) |
三、产品特点
1. 单克隆抗体——批间一致性好
通过大规模细胞培养法生产,确保不同批次间性能一致,适合诊断试剂盒工业化生产。
2. 双克隆设计——配对明确
| 克隆号 | 推荐用途 | 说明 |
|---|---|---|
| crp-11 | 标记 | 适用于HRP、胶体金等标记 |
| crp-5 | 包被 | 适用于ELISA板包被、NC膜包被 |
3. 高特异性——不与其他His Tag蛋白交叉
本品经过严格特异性验证,不与带有His Tag的蛋白发生结合,避免假阳性。
4. 小鼠IgG1亚类,Kappa轻链
亚类明确,便于与二抗系统配合使用。
四、CRP的临床意义
| CRP水平(mg/L) | 临床意义 |
|---|---|
| <3 | 正常 |
| 3-10 | 轻度升高,可能轻微炎症或病毒感染 |
| 10-50 | 中度升高,活动性炎症、细菌感染可能 |
| 50-100 | 显著升高,细菌感染可能性大 |
| >100 | 严重升高,严重细菌感染、脓毒症 |
细菌感染 vs 病毒感染鉴别:
- 细菌感染:CRP常>50mg/L
- 病毒感染:CRP常<20mg/L
五、主要应用场景
1. CRP ELISA检测试剂盒开发(双抗夹心)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被crp-5(2-5μg/mL) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加CRP标准品和待测样品 |
| 4 | 加HRP-crp-11检测 |
| 5 | 加TMB显色 |
2. CRP胶体金免疫层析试纸条开发
- 包被crp-5于NC膜检测线
- crp-11标记胶体金
- 15分钟判读结果
3. CRP荧光免疫层析试纸条开发
- 包被crp-5于NC膜检测线
- crp-11标记荧光微球
- 荧光分析仪定量检测
4. CRP化学发光检测试剂盒开发
- 包被crp-5
- crp-11标记吖啶酯或碱性磷酸酶
- 加化学发光底物检测
六、实验操作要点
1. ELISA方案(推荐:crp-5包被 / crp-11标记)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被crp-5 | 2-5μg/mL,4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加CRP标准品和待测样品 | 建立标准曲线 |
| 4 | 加HRP-crp-11 | 1:2000-5000稀释,室温1小时 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 6 | 终止读数 | 450nm |
2. 胶体金试纸条方案
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被crp-5于NC膜检测线 | 0.5-2mg/mL |
| 2 | 包被抗小鼠IgG于质控线 | 0.5-1mg/mL |
| 3 | 制备crp-11-胶体金标记 | 优化标记pH和浓度 |
| 4 | 组装试纸条 | 样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫 |
| 5 | 滴加血清/血浆样品 | 15分钟判读结果 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | CRP标准品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 不含CRP的缓冲液 | 评估背景 |
| 二抗对照 | 不加一抗 | 评估非特异性结合 |
| 特异性对照 | His Tag蛋白包被孔 | 验证与His Tag无交叉 |
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃保存,避光 |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议分装保存 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
八、常见问题
Q1:crp-5和crp-11有什么区别?
A1:
| 克隆号 | 推荐用途 | 说明 |
|---|---|---|
| crp-5 | 包被 | ELISA板包被、NC膜包被 |
| crp-11 | 标记 | HRP、胶体金、荧光标记 |
Q2:为什么crp-5和crp-11要配对使用?
A2:两个克隆识别CRP的不同抗原表位,配对使用可构建双抗夹心ELISA,实现高特异性、高灵敏度检测。
Q3:本品与His Tag蛋白有交叉反应吗?
A3:没有。本品经过严格特异性验证,不与带有His Tag的蛋白发生结合。在检测重组CRP蛋白时,不会受CRP上可能存在的His Tag干扰。
Q4:在临床应用中,CRP检测的正常参考值是多少?
A4:正常参考值通常为**<3mg/L**(或<5mg/L),建议根据所用试剂盒说明书确定参考范围。
Q5:如何确定最佳稀释度?
A5:建议通过预实验进行滴定:将包被抗体从1:500开始倍比稀释至1:8000,标记抗体从1:500开始倍比稀释至1:16000,选择信噪比最高的组合。
Q6:抗体如何保存?
A6:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品通过大规模细胞培养法生产,批间一致性好,crp-5/crp-11配对方案明确,适用于ELISA、免疫层析、化学发光等诊断试剂的生产。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
