HRP-兔抗小鼠IgG(H+L):小鼠模型研究的精准酶标二抗(不交叉人IgG)
在小鼠模型研究中,抗小鼠IgG二抗是使用频率最高的检测工具之一。当您的实验体系涉及人源样本(如人源化小鼠模型、人血清培养的细胞)时,普通抗小鼠IgG二抗可能与人IgG发生交叉反应,导致假阳性结果。不交叉人IgG的兔抗小鼠IgG二抗便成为理想选择。
今天,我们以**HRP-兔抗小鼠IgG(H+L)(不交叉人IgG)**为例,为您解析这类产品在小鼠免疫检测中的独特价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | HRP-兔抗小鼠IgG(H+L)(不交叉人IgG) |
| 宿主 | 兔 |
| 特异性 | 识别小鼠IgG的重链和轻链(H+L),不交叉人IgG |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右(以标记物计2mg/mL左右) |
| 规格 | 1mg/支 |
| 保存条件 | -20℃ |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA推荐稀释度 | 1:4000-20000 |
| WB推荐稀释度 | 1:4000-12000 |
| IHC推荐稀释度 | 1:500-2500 |
| 稀释性能 | 可稀释到数万倍后仍具有使用价值 |
| 起始工作浓度 | 1:5000-1:10000(ELISA) |
三、产品特点
1. 不交叉人IgG——关键特性
本品经过严格交叉吸附处理,不与人IgG发生交叉反应,特别适合人源化小鼠模型、含人血清样本的检测体系。
2. H+L全长识别——信号更强
本品为H+L型,同时识别小鼠IgG的重链和轻链,可结合的位点更多,信号强度更高。
3. HRP标记——高灵敏度检测
HRP(辣根过氧化物酶)标记可实现酶催化信号放大,检测灵敏度可达pg/mL级别。
4. 高稀释倍数——经济耐用
推荐稀释度1:4000-20000,使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值。
5. 多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术、胶体金等多种检测平台。
四、普通抗小鼠IgG vs 不交叉人IgG版本
| 对比维度 | 普通抗小鼠IgG | 不交叉人IgG版本 |
|---|---|---|
| 与人IgG交叉 | 可能存在 | 无交叉 |
| 适用人源化小鼠模型 | 背景高 | 理想选择 |
| 适用含人血清样本 | 背景高 | 理想选择 |
| 常规小鼠样本检测 | 适用 | 适用 |
选择建议:涉及人源样本的检测,强烈推荐使用不交叉人IgG版本。
五、主要应用场景
1. 人源化小鼠模型中的抗体检测
| 应用 | 说明 |
|---|---|
| PDX模型 | 检测小鼠抗人IgG抗体(ADA) |
| CAR-T模型 | 检测小鼠抗CAR抗体 |
| 人源化抗体药物 | 检测小鼠体内药物浓度 |
优势:本品不识别任何人源IgG,确保检测信号只来自小鼠IgG。
2. 含人血清的细胞培养上清检测
- 检测小鼠免疫细胞分泌的抗体
- 不受培养基中胎牛血清(含牛IgG)干扰
- 不受人血清干扰
3. 人-鼠嵌合样本的检测
- 同时含人和小鼠IgG的样本
- 特异性检测小鼠IgG组分
4. 常规小鼠血清/组织检测
- ELISA、WB、IHC、流式细胞术
- 与普通抗小鼠IgG性能相当
六、实验操作要点
1. ELISA方案
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗原/捕获抗体 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加小鼠血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加HRP-兔抗小鼠IgG | 1:5000-10000稀释 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 6 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释液选择
| 推荐稀释液 | 说明 |
|---|---|
| 含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0) | 首选 |
3. 特异性验证
| 验证项 | 方法 | 预期结果 |
|---|---|---|
| 与小鼠IgG反应 | ELISA包被人IgG | 无信号 |
| 与人IgG无交叉 | ELISA包被小鼠IgG | 强阳性 |
4. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 小鼠IgG标准品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 未免疫小鼠血清 | 评估背景 |
| 交叉反应对照 | 人IgG包被孔 | 验证不交叉 |
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃保存,避光 |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议分装保存 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
八、常见问题
Q1:“不交叉人IgG”是什么意思?
A1:本品经过严格的交叉吸附处理,去除与人IgG有交叉反应的抗体成分,确保只识别小鼠IgG,不识别任何人源IgG。
Q2:在哪些场景下必须使用不交叉人IgG版本?
A2:
- 人源化小鼠模型(检测小鼠抗药抗体ADA)
- 含人血清的细胞培养上清检测
- 人-鼠嵌合样本
- 使用人源化抗体药物的动物实验
Q3:H+L型二抗与Fc特异性二抗有什么区别?
A3:H+L型识别IgG的重链和轻链,信号更强;Fc特异性仅识别Fc段。常规ELISA/WB推荐H+L型。
Q4:如何验证本品与人IgG无交叉?
A4:直接ELISA验证:
- 包被人IgG(10μg/mL)
- 加HRP-兔抗小鼠IgG(1:5000)
- 加TMB显色
- 应无显色或OD值接近空白对照
Q5:如何确定最佳稀释度?
A5:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:2000开始倍比稀释至1:32000,选择信噪比最高的稀释度。
Q6:抗体如何保存?
A6:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好,尤其适用于人源化小鼠模型和含人源样本的检测体系。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
