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HRP-兔抗小鼠IgG(H+L):小鼠模型研究的精准酶标二抗(不交叉人IgG)

发布时间:2026-05-03 点击数:39

在小鼠模型研究中,抗小鼠IgG二抗是使用频率最高的检测工具之一。当您的实验体系涉及人源样本(如人源化小鼠模型、人血清培养的细胞)时,普通抗小鼠IgG二抗可能与人IgG发生交叉反应,导致假阳性结果。不交叉人IgG的兔抗小鼠IgG二抗便成为理想选择。

今天,我们以**HRP-兔抗小鼠IgG(H+L)(不交叉人IgG)**为例,为您解析这类产品在小鼠免疫检测中的独特价值。


一、产品概述

项目 参数
产品名称 HRP-兔抗小鼠IgG(H+L)(不交叉人IgG)
宿主
特异性 识别小鼠IgG的重链和轻链(H+L)不交叉人IgG
浓度 以抗体计1mg/mL左右(以标记物计2mg/mL左右)
规格 1mg/支
保存条件 -20℃
有效期 以产品标签为准

二、核心性能

性能指标 参数
ELISA推荐稀释度 1:4000-20000
WB推荐稀释度 1:4000-12000
IHC推荐稀释度 1:500-2500
稀释性能 可稀释到数万倍后仍具有使用价值
起始工作浓度 1:5000-1:10000(ELISA)

三、产品特点

1. 不交叉人IgG——关键特性

本品经过严格交叉吸附处理,不与人IgG发生交叉反应,特别适合人源化小鼠模型、含人血清样本的检测体系。

2. H+L全长识别——信号更强

本品为H+L型,同时识别小鼠IgG的重链和轻链,可结合的位点更多,信号强度更高。

3. HRP标记——高灵敏度检测

HRP(辣根过氧化物酶)标记可实现酶催化信号放大,检测灵敏度可达pg/mL级别。

4. 高稀释倍数——经济耐用

推荐稀释度1:4000-20000,使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值。

5. 多平台兼容

适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术、胶体金等多种检测平台。


四、普通抗小鼠IgG vs 不交叉人IgG版本

对比维度 普通抗小鼠IgG 不交叉人IgG版本
与人IgG交叉 可能存在 无交叉
适用人源化小鼠模型 背景高 理想选择
适用含人血清样本 背景高 理想选择
常规小鼠样本检测 适用 适用

选择建议:涉及人源样本的检测,强烈推荐使用不交叉人IgG版本


五、主要应用场景

1. 人源化小鼠模型中的抗体检测

应用 说明
PDX模型 检测小鼠抗人IgG抗体(ADA)
CAR-T模型 检测小鼠抗CAR抗体
人源化抗体药物 检测小鼠体内药物浓度

优势:本品不识别任何人源IgG,确保检测信号只来自小鼠IgG。

2. 含人血清的细胞培养上清检测

  • 检测小鼠免疫细胞分泌的抗体
  • 不受培养基中胎牛血清(含牛IgG)干扰
  • 不受人血清干扰

3. 人-鼠嵌合样本的检测

  • 同时含人和小鼠IgG的样本
  • 特异性检测小鼠IgG组分

4. 常规小鼠血清/组织检测

  • ELISA、WB、IHC、流式细胞术
  • 与普通抗小鼠IgG性能相当

六、实验操作要点

1. ELISA方案

步骤 操作 说明
1 包被抗原/捕获抗体 4℃过夜
2 封闭 含BSA或脱脂奶粉
3 加小鼠血清样品 室温孵育1-2小时
4 加HRP-兔抗小鼠IgG 1:5000-10000稀释
5 加TMB显色 15-20分钟
6 终止读数 450nm

2. 稀释液选择

推荐稀释液 说明
含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0) 首选

3. 特异性验证

验证项 方法 预期结果
与小鼠IgG反应 ELISA包被人IgG 无信号
与人IgG无交叉 ELISA包被小鼠IgG 强阳性

4. 对照设置

对照类型 组成 目的
阳性对照 小鼠IgG标准品 验证检测体系
阴性对照 未免疫小鼠血清 评估背景
交叉反应对照 人IgG包被孔 验证不交叉

七、保存与使用注意事项

项目 说明
保存条件 -20℃保存,避光
分装建议 避免反复冻融,建议分装保存
有效期 以产品标签为准

八、常见问题

Q1:“不交叉人IgG”是什么意思?

A1:本品经过严格的交叉吸附处理,去除与人IgG有交叉反应的抗体成分,确保只识别小鼠IgG,不识别任何人源IgG。

Q2:在哪些场景下必须使用不交叉人IgG版本?

A2

  • 人源化小鼠模型(检测小鼠抗药抗体ADA)
  • 含人血清的细胞培养上清检测
  • 人-鼠嵌合样本
  • 使用人源化抗体药物的动物实验

Q3:H+L型二抗与Fc特异性二抗有什么区别?

A3:H+L型识别IgG的重链和轻链,信号更强;Fc特异性仅识别Fc段。常规ELISA/WB推荐H+L型。

Q4:如何验证本品与人IgG无交叉?

A4:直接ELISA验证:

  • 包被人IgG(10μg/mL)
  • 加HRP-兔抗小鼠IgG(1:5000)
  • 加TMB显色
  • 应无显色或OD值接近空白对照

Q5:如何确定最佳稀释度?

A5:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:2000开始倍比稀释至1:32000,选择信噪比最高的稀释度。

Q6:抗体如何保存?

A6:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。


本产品已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好,尤其适用于人源化小鼠模型和含人源样本的检测体系。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。

(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)



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