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山羊抗小鼠IgG(H+L):小鼠模型研究的黄金标准二抗

发布时间:2026-05-03 点击数:38

在小鼠模型研究中,山羊抗小鼠IgG(H+L)是使用频率最高的检测工具之一。无论是基因工程小鼠的蛋白表达验证、肿瘤免疫治疗的药效评价,还是自身免疫病模型的机制研究,这支经典二抗都是实验室的“口粮级”必备试剂。

今天,我们为您系统解析这款产品的核心价值和应用要点。


一、产品概述

项目 参数
产品名称 山羊抗小鼠IgG(H+L)
宿主 山羊
特异性 识别小鼠IgG的重链和轻链(H+L)
蛋白浓度 约5mg/mL(OD280=7)
产品纯度 ≥90%
规格 1mg/支
保存条件 -20℃
有效期 以产品标签为准

二、核心性能

性能指标 参数
ELISA推荐稀释度 1:20000-100000
WB推荐稀释度 1:20000-50000
ICC/IF推荐稀释度 1:200-2000
Flow Cyt推荐稀释度 1:1000-4000
起始工作浓度 1:5000-1:10000(ELISA)

三、产品特点

1. 山羊源——经典宿主选择

山羊免疫体系经过数十年验证,亲和力与特异性平衡良好,是二抗生产的黄金标准宿主,与兔源一抗联用是常规ELISA/WB的黄金组合。

2. H+L全长识别——信号更强

本品为H+L型,同时识别小鼠IgG的重链和轻链,可结合的位点更多,信号强度更高,尤其适合低丰度靶标检测。

3. 高纯度——背景更干净

  • 亲和纯化,抗体纯度≥90%
  • 经验证不与BSA、酪蛋白结合,可放心使用含BSA的封闭体系

4. 高稀释倍数——经济耐用

ELISA推荐稀释度1:20000-100000,使用得当可显著降低单次实验成本。

5. 多平台兼容

适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术、胶体金等多种检测平台。


四、山羊源 vs 兔源:如何选择?

对比维度 山羊抗小鼠IgG 兔抗小鼠IgG
与兔源一抗联用 理想选择 不适用
与山羊源一抗联用 可能交叉 理想选择
多色标记兼容性 与兔源、大鼠源兼容 与山羊源、大鼠源兼容
常规应用 最常用,性价比高 特定场景

选择建议:常规ELISA/WB检测,若一抗为兔源,推荐选择山羊源二抗。


五、小鼠模型的应用场景

研究领域 典型应用
基因工程小鼠 敲除/转基因小鼠蛋白表达验证
肿瘤免疫 PD-1/PD-L1药效评价
自身免疫病 EAE、CIA模型抗体检测
疫苗评价 候选疫苗免疫原性检测
抗体药物 人源化小鼠抗药抗体(ADA)检测

六、主要应用平台

应用平台 推荐稀释度 说明
ELISA 1:20000-100000 检测小鼠血清特异性抗体
Western Blot 1:20000-50000 检测小鼠IgG条带
IHC 1:200-2000 组织切片中IgG定位
流式细胞术 1:1000-4000 检测B细胞表面IgG
胶体金试纸条 根据实验优化 快速检测

七、实验操作要点

1. 稀释液选择

推荐稀释液 说明
含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0) 首选
其它正确稀释液 可替代

2. 流式细胞术Fc受体阻断

检测B细胞表面IgG时,B细胞表达Fc受体,建议使用抗小鼠CD16/CD32抗体预处理细胞,避免非特异性结合。

3. 稀释度优化

建议通过预实验确定最佳稀释度:

初筛稀释度 优化范围
1:5000(ELISA) 1:2000-1:100000

4. 对照设置

对照类型 组成 目的
阳性对照 小鼠IgG标准品或阳性血清 验证检测体系
阴性对照 未免疫小鼠血清 评估背景
二抗对照 不加一抗 评估二抗特异性

八、保存与使用注意事项

项目 说明
保存条件 -20℃保存,避光
分装建议 避免反复冻融,建议分装保存
有效期 以产品标签为准

九、常见问题

Q1:H+L型二抗与Fc特异性二抗有什么区别?

A1:H+L型识别IgG的重链和轻链,信号更强;Fc特异性仅识别Fc段。常规ELISA/WB推荐H+L型。存在游离轻链的样本建议选择Fc特异性。

Q2:本产品能否检测小鼠IgG亚类?

A2:本品识别所有IgG亚类(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3),适用于总IgG检测。如需检测特定亚类,请选择亚类特异性二抗。

Q3:在Western Blot中还原和非还原条件有什么区别?

A3:还原条件下(DTT/β-巯基乙醇),重链(~50kDa)和轻链(~25kDa)分离,出现两条带;非还原条件下识别完整IgG(~150kDa)。

Q4:如何确定最佳稀释度?

A4:建议通过预实验进行滴定:将二抗从1:5000开始倍比稀释至1:160000,选择信噪比最高的稀释度作为工作浓度。

Q5:抗体如何保存?

A5:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。


本产品已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好,适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。

(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)



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