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兔抗人IgG(H+L):人源样本检测的理想二抗选择

发布时间:2026-05-03 点击数:40

在人源样本的免疫学检测中,抗人IgG二抗是使用频率最高的检测工具之一。当您的实验体系需要与山羊源试剂配合使用时,兔源抗人IgG二抗便成为理想选择。

今天,我们以兔抗人IgG(H+L)为例,为您解析这类产品在人IgG检测中的应用价值。


一、产品概述

项目 参数
产品名称 兔抗人IgG(H+L)
宿主
特异性 识别人IgG的重链和轻链(H+L)
蛋白浓度 约5mg/mL(OD280=7)
产品纯度 ≥90%
规格 1mg/支
保存条件 -20℃
有效期 以产品标签为准

二、核心性能

性能指标 参数
ELISA推荐稀释度 1:20000-100000
WB推荐稀释度 1:20000-50000
ICC/IF推荐稀释度 1:200-2000
Flow Cyt推荐稀释度 1:1000-4000
起始工作浓度 1:5000-1:10000(ELISA)

三、产品特点

1. H+L全长识别——信号更强

本品为H+L型,同时识别人IgG的重链和轻链,可结合的位点更多,信号强度更高,尤其适合低丰度靶标检测。

2. 兔源宿主——避免与山羊源试剂交叉

兔源二抗与山羊源一抗/检测抗体无交叉反应,特别适合与山羊源试剂联用的多色标记实验。

3. 高纯度——背景更干净

  • 亲和纯化,抗体纯度≥90%
  • 经验证不与BSA、酪蛋白结合,可放心使用含BSA的封闭体系

4. 高稀释倍数——经济耐用

ELISA推荐稀释度1:20000-100000,使用得当可显著降低单次实验成本。


四、兔源 vs 山羊源:如何选择?

对比维度 兔抗人IgG 山羊抗人IgG
与山羊源试剂交叉 无交叉 可能交叉
与兔源试剂交叉 可能交叉 无交叉
多色标记兼容性 与山羊源、大鼠源兼容 与兔源、大鼠源兼容
推荐应用 与山羊源一抗联用 与兔源一抗联用

选择建议:若实验体系中已使用山羊源一抗,推荐选择兔源二抗避免交叉。


五、主要应用场景

应用平台 推荐稀释度 说明
ELISA 1:20000-100000 检测人血清特异性抗体
Western Blot 1:20000-50000 检测人IgG条带
ICC/IF 1:200-2000 组织切片中IgG定位
流式细胞术 1:1000-4000 检测细胞表面IgG
多色标记 根据实验优化 与山羊源试剂联用

六、实验操作要点

1. 稀释液选择

推荐稀释液 说明
含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0) 首选
其它正确稀释液 可替代

2. 稀释度优化

建议通过预实验确定最佳稀释度:

初筛稀释度 优化范围
1:5000(ELISA) 1:2000-1:100000

3. 对照设置

对照类型 组成 目的
阳性对照 人IgG标准品或阳性血清 验证检测体系
阴性对照 健康人血清 评估背景
二抗对照 不加一抗 评估二抗特异性

七、保存与使用注意事项

项目 说明
保存条件 -20℃保存,避光
分装建议 避免反复冻融,建议分装保存
有效期 以产品标签为准

八、常见问题

Q1:H+L型二抗与Fc特异性二抗有什么区别?

A1:H+L型识别IgG的重链和轻链,信号更强;Fc特异性仅识别Fc段。常规ELISA/WB推荐H+L型。存在游离轻链的样本建议选择Fc特异性。

Q2:本产品能否用于检测人IgG亚类?

A2:本品识别所有IgG亚类(IgG1-4),适用于总IgG检测。如需检测特定亚类,请选择亚类特异性二抗。

Q3:在Western Blot中还原和非还原条件有什么区别?

A3:还原条件下(DTT/β-巯基乙醇),重链(~50kDa)和轻链(~25kDa)分离,出现两条带;非还原条件下识别完整IgG(~150kDa)。

Q4:如何确定最佳稀释度?

A4:建议通过预实验进行滴定:将二抗从1:5000开始倍比稀释至1:160000,选择信噪比最高的稀释度作为工作浓度。

Q5:抗体如何保存?

A5:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。


本产品已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好,适用于ELISA、Western Blot、IHC、流式细胞术等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。

(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)



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