HRP-山羊抗人IgG(Fab特异性):精准识别IgG Fab片段,满足高灵敏度检测需求
在免疫学检测中,HRP标记的二抗是ELISA、Western Blot、IHC等实验的核心工具。当检测体系需要特异性识别人IgG的Fab片段时,Fab特异性二抗便成为理想选择。
今天,我们以HRP-山羊抗人IgG(Fab特异性)为例,为您解析这类产品的技术特点和应用场景。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | HRP-山羊抗人IgG(Fab特异性) |
| 宿主 | 山羊 |
| 标记物 | HRP(辣根过氧化物酶) |
| 特异性 | 识别人IgG的Fab片段,不识别Fc片段 |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右(以标记物计2mg/mL左右) |
| 规格 | 1mg/支 |
| 保存条件 | -20℃ |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA推荐稀释度 | 1:4000-20000 |
| WB推荐稀释度 | 1:4000-12000 |
| IHC推荐稀释度 | 1:500-2500 |
| 稀释性能 | 可稀释到数万倍后仍具有使用价值 |
三、产品特点
1. Fab特异性——精准识别
本产品特异性识别人IgG的Fab片段,不识别Fc片段。这一特性使其在需要避免Fc受体干扰的实验中具有独特优势:
| 应用场景 | 优势 |
|---|---|
| Fc受体阳性细胞检测 | 避免与细胞表面Fc受体非特异性结合 |
| 免疫复合物检测 | 精准识别复合物中的IgG |
| 避免类风湿因子干扰 | 减少假阳性风险 |
2. HRP标记——高灵敏度检测
HRP(辣根过氧化物酶)标记可实现酶催化信号放大,检测灵敏度可达pg/mL级别。
3. 高稀释倍数——经济耐用
推荐稀释度1:4000-20000,使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值,显著降低单次实验成本。
4. 多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、IHC、胶体金等多种检测平台。
四、应用场景
| 应用平台 | 推荐稀释度 | 说明 |
|---|---|---|
| ELISA | 1:4000-20000 | 间接法检测人源抗体 |
| Western Blot | 1:4000-12000 | 检测人IgG条带 |
| IHC | 1:500-2500 | 组织切片中IgG定位 |
| 流式细胞术 | 根据实验优化 | 检测细胞表面IgG |
五、实验操作要点
1. 稀释液选择
| 推荐稀释液 | 说明 |
|---|---|
| 含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0) | 首选 |
| 其它正确稀释液 | 可替代 |
2. 工作液使用原则
- 原则上现用现配
- 4℃保存不超过24小时
- 如需长期保存,请添加稳定剂
3. 稀释度优化
建议通过预实验确定最佳稀释度:
| 初筛稀释度 | 优化范围 |
|---|---|
| 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
六、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃保存,避光 |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议分装保存 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 稀释液 | 推荐使用含BSA和吐温-20的PBS |
七、常见问题
Q1:Fab特异性与H+L型二抗有什么区别?
A1:Fab特异性二抗只识别IgG的Fab片段,不识别Fc片段;H+L型二抗识别完整IgG分子(重链+轻链)。在Fc受体阳性细胞检测中,Fab特异性可降低背景。
Q2:本产品与Fc特异性二抗有何不同?
A2:Fab特异性识别Fab段,Fc特异性识别Fc段。选择取决于实验需求:如需检测完整IgG且避免Fc受体干扰,Fab特异性是理想选择。
Q3:如何确定最佳稀释度?
A3:建议通过预实验进行滴定:将HRP标记抗体从1:2000开始倍比稀释至1:32000,选择信噪比最高的稀释度作为工作浓度。
Q4:本产品能否用于流式细胞术?
A4:可以,但需注意B细胞等表达Fc受体的细胞需先进行Fc受体阻断,或使用F(ab')2片段化版本。
Q5:抗体如何保存?
A5:请存放于**-20℃**保存,避免反复冻融,建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品已通过多家客户验证,灵敏度高、特异性好,适用于ELISA、Western Blot、IHC等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
