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联苯菊酯与载体蛋白BSA及OVA抗原的制备与应用研究

发布时间:2025-07-16 点击数:147

联苯菊酯作为一种高效拟除虫菊酯类杀虫剂,在农业生产中具有广泛应用。然而,其残留问题可能对生态环境和人类健康构成潜在威胁。因此,建立灵敏、特异的联苯菊酯检测方法具有重要意义。本研究聚焦于联苯菊酯与载体蛋白BSA及OVA抗原的制备与应用,旨在为免疫分析技术的开发提供关键材料基础。

在抗原制备过程中,联苯菊酯分子结构中的羧基通过碳二亚胺法活化后,与载体蛋白BSA或OVA的游离氨基形成稳定共价连接。该反应需严格控制pH值、反应时间及摩尔比等参数,以确保偶联效率。经紫外扫描和SDS-PAGE电泳验证,成功获得联苯菊酯-BSA和联苯菊酯-OVA复合抗原,其偶联比分别为18:1和12:1,满足免疫原性与包被抗原的技术要求。

制备的复合抗原在免疫分析中展现出显著优势。联苯菊酯-BSA作为免疫原注射至Balb/c小鼠体内,可诱导产生高效价抗体。间接ELISA检测显示,抗血清效价达1:51200,半数抑制浓度(IC50)为0.38 ng/mL,表明其具备高灵敏度。联苯菊酯-OVA则作为包被抗原,与抗体形成特异性结合,为后续免疫层析或酶联免疫吸附试验奠定基础。

该研究进一步探讨了复合抗原在食品安全监测中的应用潜力。通过优化反应条件,建立的免疫检测方法对蔬菜样本中联苯菊酯残留的检出限低至0.05 μg/kg,回收率为85%-110%,且与其它菊酯类化合物交叉反应率小于5%。该方法显著优于传统色谱技术,适用于大规模样本筛查。此外,复合抗原还可用于制备单克隆抗体,为开发便携式检测器件提供核心材料。

结论表明,联苯菊酯与BSA、OVA的复合抗原制备工艺稳定可靠,其免疫原性与反应活性均达到预期标准。基于该抗原建立的检测体系兼具高灵敏度与特异性,为农药残留监控提供了高效技术手段。未来研究可进一步探索抗原结构修饰对抗体亲和力的影响,以拓展其在环境监测与临床诊断中的应用范围。



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