牛结核病诊断用MPB70与MPB83融合蛋白抗原的研究进展

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种严重人畜共患传染病，不仅对全球畜牧业造成重大经济损失，更对公共卫生安全构成持续威胁。该病的有效防控依赖于快速、准确的诊断技术。在众多诊断抗原中，牛分枝杆菌分泌蛋白MPB70和MPB83因其强免疫原性而备受关注。然而，单一抗原在敏感性和特异性方面存在局限，难以满足复杂多变的现场诊断需求。因此，将MPB70与MPB83构建成融合蛋白，以期协同增强其免疫诊断效能，已成为当前研究的热点。本文旨在系统梳理该融合蛋白抗原在牛结核病诊断应用中的最新研究进展。

在分子特性方面，MPB70与MPB83具有高度的同源性与结构关联性。两者均属于PE/PPE蛋白家族，由染色体上的相邻基因编码，共享高达百分之四十的氨基酸序列一致性。MPB83是膜锚定脂蛋白，而MPB70是其分泌型同源物，这一差异导致它们在细菌感染宿主过程中的定位与功能有所不同。研究表明，这两种蛋白均是牛结核病感染过程中宿主体液免疫与细胞免疫应答的重要靶标。尤为重要的是，它们在牛体内的抗体应答水平远高于其他分枝杆菌抗原，这为其作为诊断靶标提供了坚实的分子生物学基础。

融合蛋白的构建策略是提升诊断性能的核心环节。早期研究多采用化学交联法，但该方法易导致蛋白构象改变和批间差异。随着基因工程技术的成熟，重组DNA技术成为主流。通过设计柔性 linker 肽将MPB70与MPB83的基因序列进行串联，并在大肠杆菌或分枝杆菌等表达系统中进行高效表达，可获得结构均一的重组融合蛋白。优化 linker 的长度与氨基酸组成是关键，其目的是最大限度地减少结构域间的空间位阻，保持各自天然构象与表位完整性。此外，表达系统的选择直接影响蛋白的糖基化修饰与溶解性，进而影响其免疫反应性。

在诊断应用评估中，MPB70/MPB83融合蛋白展现出显著优势。大量血清学研究表明，与单一抗原相比，该融合蛋白在酶联免疫吸附试验中能够同时检测针对两种抗原的抗体，显著提高了对牛结核病阳性血清的检测灵敏度，尤其对亚临床感染的检出率有明显提升。在特异性方面，尽管存在与其他分枝杆菌（如禽分枝杆菌）的交叉反应风险