小鼠抗鸡IgM(μ链特异性):禽类急性感染诊断与IgM捕获的核心单抗工具
在家禽养殖和禽病防控领域,鸡是最重要的经济动物之一。IgM是早期免疫应答的标志——它的出现标志着近期感染、疫苗早期应答或免疫激活。在鸡新城疫、禽流感、传染性支气管炎等急性疫病的血清学诊断中,IgM的精准检测是鉴别急性感染与既往感染或疫苗免疫的关键。小鼠抗鸡IgM(μ链特异性)单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性,成为ELISA检测和IgM捕获纯化的核心工具。
今天,我们以小鼠抗鸡IgM(μ链特异性)单抗为例,为您解析这类产品在禽类急性感染诊断与免疫监测中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗鸡IgM(μ链特异性) |
| 免疫原/特异性 | 鸡IgM μ链,不和鸡其它Ig(如IgG)发生结合 |
| 单抗克隆号 | CM-4、CM-5、CM-6 |
| 亚类/轻链 | CM-4(IgG1, Kappa);CM-5(IgG1, Kappa);CM-6(IgG2a, Kappa) |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7,对应蛋白浓度约5mg/mL,具体以标签标识为准 |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS,pH 7.2,N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL) |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃(避光,或-16℃及以下温度) |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 仅识别鸡IgM μ链,不识别鸡IgG等其它Ig |
| 纯度 | ≥90%(以抗体计) |
| 适用平台 | ELISA、免疫亲和层析、Western Blot等 |
| 特殊应用 | CM-4可用于制备亲和柱捕获鸡血清中的IgM |
三、产品特点
-
μ链特异性——精准识别IgM
特异性针对鸡IgM的μ重链,不与鸡IgG等其他免疫球蛋白交叉反应,确保检测结果的准确性。 -
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得,批间一致性优异,适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度(≥90%)——背景低
以抗体计纯度不低于90%,非特异性吸附少,实验结果更可靠。 -
多种克隆号可选——用途灵活
- CM-4:IgG1亚类,推荐用于ELISA及免疫亲和柱制备
- CM-5:IgG1亚类,推荐用于ELISA
- CM-6:IgG2a亚类,推荐用于ELISA
-
多平台兼容
适用于ELISA、免疫亲和层析、Western Blot等多种检测平台。
四、鸡IgM检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 新城疫病毒感染 | 急性期IgM阳性,恢复期IgG(IgY)阳性 |
| 高致病性禽流感(H5/H7/H9) | IgM阳性提示近期感染,用于早期筛查 |
| 传染性支气管炎病毒感染 | 早期IgM出现,用于急性感染诊断 |
| 传染性法氏囊病 | 免疫抑制状态下IgM应答评估 |
| 疫苗免疫评价 | 免疫后IgM出现,反映疫苗诱导的早期体液应答 |
| 雏鸡母源抗体与自身免疫区分 | 早期感染鉴别诊断 |
五、主要应用场景
1. 鸡血清中特异性IgM抗体的ELISA检测(间接法)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原(如新城疫病毒抗原) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的鸡血清 |
| 4 | 加入小鼠抗鸡IgM(μ链特异性)单抗(如CM-4/5/6) |
| 5 | 加入HRP标记的抗小鼠IgG二抗 |
| 6 | 加TMB显色 |
2. 鸡血清总IgM的ELISA定量检测(捕获法)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被小鼠抗鸡IgM(μ链特异性)单抗(如CM-4) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同稀释度的鸡血清或IgM标准品 |
| 4 | 加入HRP标记的鸡IgM检测抗体(或其他检测系统) |
| 5 | 加TMB显色 |
3. 免疫亲和柱制备——从鸡血清中捕获IgM
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将CM-4单抗与CNBr活化的Sepharose或其它亲和介质偶联 |
| 2 | 装柱、平衡 |
| 3 | 上样鸡血清或腹水 |
| 4 | 洗涤去除非特异性结合蛋白 |
| 5 | 低pH缓冲液洗脱纯化的鸡IgM |
推荐:CM-4克隆号特别适用于亲和柱制备。
4. 急性感染与既往感染/疫苗免疫的鉴别诊断
| 检测结果 | 判断 |
|---|---|
| IgM阳性、IgY阴性 | 急性感染早期 |
| IgM阳性、IgY阳性 | 急性感染期 |
| IgM阴性、IgY阳性 | 既往感染或疫苗免疫后 |
六、实验操作要点
1. 间接ELISA方案(检测鸡特异性IgM)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被特异性抗原 | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加鸡血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加小鼠抗鸡IgM(μ链特异性) | 建议稀释度:1:2000-1:10000 |
| 5 | 加HRP-抗小鼠IgG二抗 | 按二抗说明书稀释 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
2. 捕获ELISA方案(检测鸡总IgM)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被小鼠抗鸡IgM(μ链特异性) | CM-4推荐,4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA |
| 3 | 加鸡血清样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 加检测抗体 | HRP标记的抗鸡IgM抗体 |
| 5 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
3. 免疫亲和柱制备简要方案
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 推荐克隆号 | CM-4 |
| 偶联介质 | CNBr活化Sepharose 4B(或等效产品) |
| 偶联条件 | pH 8.3-8.5,室温偶联2小时或4℃过夜 |
| 偶联效率 | 通常可达80-95% |
| 洗脱条件 | 0.1M甘氨酸-HCl,pH 2.5-3.0 |
4. 稀释液与工作浓度
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 推荐稀释液 | 含0.2% BSA和0.05%吐温-20的0.01M PBS(pH 7.0-7.2) |
| 建议起始工作浓度 | ELISA:1:2000-1:8000(需自行滴定) |
| 亲和柱偶联量 | 每mL介质建议偶联2-5mg单抗 |
5. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知阳性鸡血清(感染早期) | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | SPF鸡血清/未免疫鸡血清 | 评估背景 |
| 一抗对照 | 不加小鼠抗鸡IgM单抗 | 评估非特异性结合 |
6. 重要操作提示
- 本品为μ链特异性单抗,不识别鸡IgG,检测特异性高
- 三种克隆号(CM-4、CM-5、CM-6)均可用于ELISA,CM-4还适用于亲和柱制备
- 鸡IgM为五聚体结构,分子量大,检测时需注意
- 请使用正确的实验方法,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存(或-16℃及以下温度) |
| 融化避免 | 避免过于反复融化,建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放,请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研,不用于诊断 |
八、常见问题
Q1:三种克隆号(CM-4/5/6)有什么区别?如何选择?
A1:
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| CM-4 | IgG1 | ELISA、免疫亲和柱制备 |
| CM-5 | IgG1 | ELISA |
| CM-6 | IgG2a | ELISA |
如需制备亲和柱捕获鸡血清中的IgM,建议优先选择CM-4。
Q2:本产品能用于检测鸡IgG吗?
A2:不能。本品为μ链特异性,不和鸡IgG发生结合,仅识别鸡IgM。
Q3:本产品可以用于Western Blot吗?
A3:可以。用于检测还原或非还原条件下鸡IgM重链(μ链,约75kDa)。
Q4:如何确定最佳工作稀释度?
A4:建议通过预实验进行滴定:将抗体从1:500开始倍比稀释至1:32000(或更高),选择信噪比最高的稀释度。
Q5:产品如何保存?
A5:请存放于-20℃,避免反复冻融,建议分装保存。如需长期4℃存放,请联系我们定制。
Q6:本产品可以用于开发鸡IgM检测试剂盒吗?
A6:可以。三种克隆号均可作为捕获抗体或检测抗体用于ELISA试剂盒开发,CM-4还可用于亲和纯化柱制备。
本产品为抗鸡IgM μ链特异性单克隆抗体,特异性高、纯度高、批次稳定,已通过多家客户验证,适用于ELISA、免疫亲和层析等免疫检测与纯化实验。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
