小鼠抗小反刍兽疫病毒（N蛋白）单克隆抗体：PPR诊断与免疫监测的核心工具
在反刍动物养殖和重大动物疫病防控领域，小反刍兽疫（PPR）俗称“羊瘟”，是由小反刍兽疫病毒引起的急性、烈性传染病，对山羊、绵羊等小反刍动物危害极大，被世界动物卫生组织列为法定报告疫病。病毒的核蛋白（N蛋白）是病毒粒子的主要结构蛋白，免疫原性强，是抗体检测的主要靶抗原。小鼠抗PPRV N蛋白单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性，成为PPR血清学诊断和疫苗免疫评价的核心工具。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗小反刍兽疫病毒（N蛋白） |
| 免疫原/特异性 | 小反刍兽疫病毒N蛋白，不结合牛血清白蛋白、羊血清白蛋白 |
| 单抗克隆号 | XFC |
| 亚类/轻链 | 小鼠IgG1，Kappa轻链（推定） |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7，对应蛋白浓度约5mg/mL（具体以标签为准） |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS，pH 7.2，N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃（或-16℃及以下温度） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 识别PPRV N蛋白，不结合BSA、GSA |
| 纯度 | ≥90% |
| 亚类 | 小鼠IgG1 |
| 推荐检测方法 | 标记后配合抗原竞争法检测PPR抗体 |
| 适用平台 | ELISA、Western Blot、免疫层析等 |
三、产品特点
-
PPRV N蛋白特异性——精准识别
特异性针对小反刍兽疫病毒的核蛋白，不与牛血清白蛋白、羊血清白蛋白发生非特异性结合，确保检测结果的准确性。 -
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得，批间一致性优异，适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度（≥90%）——背景低
以抗体计纯度不低于90%，非特异性吸附少，实验结果更可靠。 -
竞争法检测PPR抗体的理想工具
本产品适合标记后（如HRP标记），配合PPRV N蛋白抗原，用于竞争法检测PPR抗体。
四、小反刍兽疫检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| PPR血清学诊断 | 检测羊血清中PPRV特异性抗体 |
| 疫苗免疫效果评价 | 评估PPR疫苗的免疫应答水平 |
| 疫病净化与监测 | 区分野毒感染与疫苗免疫 |
| 国际贸易检疫 | 进出口羊只的PPR抗体检测 |
| 流行病学调查 | 监测PPR病毒在羊群中的流行情况 |
五、主要应用场景
1. 竞争ELISA法检测PPR抗体（核心应用）
原理：样品中的PPRV抗体与标记的抗PPRV N蛋白单抗（XFC-HRP）竞争结合固相载体上的PPRV N蛋白。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被PPRV N蛋白（重组N蛋白） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测羊血清样品 + HRP标记的XFC单抗（预混或先后加入） |
| 4 | 竞争反应（室温1小时） |
| 5 | 洗涤 |
| 6 | 加TMB显色 |
结果判读：
- OD值低 → 样品中PPR抗体阳性（竞争性抑制）
- OD值高 → 样品中PPR抗体阴性（无抑制）
2. 双抗体夹心ELISA检测PPRV抗原
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被XFC单抗（捕获抗体） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测样品（含PPRV） |
| 4 | 加入另一株抗PPRV检测抗体（酶标记） |
| 5 | 加TMB显色 |
3. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将PPRV N蛋白进行SDS-PAGE电泳 |
| 2 | 转膜 |
| 3 | 封闭 |
| 4 | 加入XFC单抗（一抗） |
| 5 | 加入HRP-抗小鼠IgG二抗 |
| 6 | ECL化学发光检测 |
预期条带：PPRV N蛋白分子量约55-58kDa。
4. 免疫层析试纸条（快速检测）
- 将XFC单抗作为检测线（T线）抗体
- 用于PPR现场快速检测
六、实验操作要点
1. 竞争ELISA方案（检测PPR抗体）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被PPRV N蛋白（重组抗原） | 4℃过夜，2-10μg/mL |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉（注意：本产品不结合BSA，正常使用） |
| 3 | 预混：待测血清（50μL）+ HRP标记的XFC单抗（50μL，工作稀释度） | 预孵育30分钟 |
| 4 | 加入预混液至ELISA板 | 室温1小时（竞争反应） |
| 5 | 洗涤 | 3-5次 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始浓度/稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| ELISA（包被捕获） | 5μg/mL | 2-20μg/mL |
| 竞争ELISA（标记后使用） | 1:2000 | 1:500-1:10000 |
| Western Blot | 1:1000 | 1:500-1:5000 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知PPR抗体阳性羊血清 | 验证竞争抑制效果 |
| 阴性对照 | 健康未免疫羊血清 | 评估背景 |
| 特异性对照 | 牛/羊血清白蛋白 | 验证不交叉—应与阴性对照相似 |
| 空白对照 | 无抗体 | 评估本底 |
4. 重要操作提示
- 特异性验证：本产品不结合牛血清白蛋白、羊血清白蛋白，确保检测结果不受白蛋白干扰。
- 竞争ELISA是核心应用：本产品最适合标记后配合PPRV N蛋白包被检测PPR抗体。
- PPR与羊痘、口蹄疫鉴别：PPR的临床症状需与羊痘、口蹄疫等鉴别，血清学检测是重要辅助手段。
- IgG1亚类：小鼠IgG1亚类标记效率高，适合HRP直接标记。
- 请使用正确的实验方法，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存（或-16℃及以下温度） |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放，请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研，不用于诊断 |
八、常见问题
Q1：小鼠抗PPRV N蛋白单抗（XFC）的主要用途是什么？
A1：主要用于竞争ELISA（阻断ELISA） 检测羊血清中PPRV特异性抗体，适用于PPR血清学诊断、疫苗免疫效果评价、疫病净化监测等。
Q2：本产品不结合BSA和羊血清白蛋白有什么意义？
A2：这一特性确保本产品在ELISA等实验中不会与封闭液中的BSA或样品中的羊血清白蛋白发生非特异性结合，降低背景，提高检测特异性。使用含BSA的封闭液检测羊血清时无需担心交叉反应。
Q3：PPR的N蛋白在检测中有什么优势？
A3：N蛋白是PPRV中最丰富、免疫原性最强的结构蛋白，感染后抗体水平高、持续时间长，是PPR抗体检测的理想靶抗原。
Q4：如何确定最佳工作稀释度？
A4：标记HRP后建议通过预实验进行滴定：将标记物从1:500开始倍比稀释至1:20000，以PPRV N蛋白包被板为固相，选择与阴性血清OD值差异最大的稀释度。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。如需长期4℃存放，请联系我们定制。
Q6：本产品可以用于其他副黏病毒（如新城疫病毒）的检测吗？
A6：PPRV属于副黏病毒科麻疹病毒属，与新域疫病毒（禽副黏病毒1型）亲缘关系较远，通常不交叉。建议使用对应物种的特异性抗体。
本产品为抗小反刍兽疫病毒N蛋白特异性单克隆抗体，特异性高、纯度高、批次稳定，已通过多家客户验证，适用于竞争ELISA等免疫检测实验。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）