BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白：HSA检测与药物代谢研究的核心工具
在生物医药研发、临床免疫检测和药物代谢动力学研究领域，人血清白蛋白（HSA）是血浆中最丰富的蛋白质，在药物运输、渗透压维持及内源性物质转运中发挥关键作用。HSA水平的异常变化与肝病、肾病、营养不良等疾病状态密切相关。此外，HSA也是药物结合研究、糖尿病糖化白蛋白检测及蛋白药物质控中的重要靶标。生物素标记的小鼠抗人血清白蛋白将生物素-亲和素信号放大系统与高特异性抗体相结合，可显著提高检测灵敏度。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白（生物素标记） |
| 宿主来源 | 小鼠 |
| 特异性 | 识别人血清白蛋白（HSA） |
| 标记物 | 生物素（Biotin） |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右 |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 保存条件 | -20℃（避光） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 流式细胞术/IF/IP | 1:200-2000 |
| IHC | 1:500-2500 |
| ELISA/Western Blot | 1:2000-20000 |
| 识别范围 | 人血清白蛋白（HSA） |
| 信号放大系统 | 配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用 |
三、产品特点
-
HSA特异性——精准识别
特异性识别人血清白蛋白（HSA），不与人血清中其他蛋白发生交叉反应。 -
生物素标记——信号放大能力强
生物素-亲和素系统是目前最灵敏的信号放大系统之一，可将信号放大数十倍至上百倍，适用于低丰度HSA检测。 -
高稀释倍数
ELISA/WB推荐稀释度1:2000-20000，经济耐用。 -
多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot、流式细胞术、免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）等多种检测平台。
四、生物素标记的优势
| 特性 | 说明 |
|---|---|
| 信号放大 | 一个生物素化抗体可结合多个链霉亲和素-HRP，实现信号级联放大 |
| 灵敏度提升 | 比直接HRP标记抗体灵敏度提高5-20倍 |
| 灵活性 | 同一生物素化抗体可配合不同检测系统（HRP、荧光、胶体金） |
五、人血清白蛋白检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 肝功能评估 | 肝病（肝硬化、肝炎）患者血清白蛋白水平降低 |
| 肾功能评估 | 肾病综合征、肾小球疾病导致白蛋白尿 |
| 糖尿病监测 | 糖化白蛋白（GA）反映短期（2-3周）血糖控制水平 |
| 药物代谢研究 | 药物与HSA结合率影响药物分布和清除 |
| 营养不良评估 | 白蛋白水平反映营养状态 |
| 蛋白药物质控 | 检测制剂中HSA残留（杂质分析） |
| 免疫检测质控 | 作为ELISA体系中的阳性对照或质控品 |
六、主要应用场景
1. HSA定量ELISA检测（核心应用）
原理：双抗体夹心法检测人血清/尿液中的HSA水平。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗人血清白蛋白捕获抗体（另一克隆） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清/尿液样品（适当稀释） |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色 |
参考正常值：成人血清白蛋白约35-55 g/L；尿液白蛋白< 30 mg/24h。
2. 尿微量白蛋白检测（肾病早期筛查）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗人血清白蛋白捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入尿液样品（未稀释或适当稀释） |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白（需优化至更高灵敏度） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色 |
3. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将人血清/尿蛋白进行SDS-PAGE电泳 |
| 2 | 转膜 |
| 3 | 封闭 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | ECL化学发光检测 |
预期条带：人血清白蛋白约66kDa。
4. 免疫组化（IHC）/免疫荧光（IF）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 人组织切片（如肾组织）固定、抗原修复 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白（IHC:1:500-2500; IF:1:200-2000） |
| 4 | 加入HRP-链霉亲和素（IHC）或荧光-链霉亲和素（IF） |
| 5 | 显色或荧光观察 |
5. 药物-HSA结合研究
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HSA包被于ELISA板 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入不同浓度的小分子药物 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白 |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色，结合率影响抗体与HSA的结合信号 |
6. 糖化白蛋白（GA）相关研究
- 用于ELISA检测体系中的HSA总蛋白定量
- 配合抗糖化白蛋白特异性抗体，可计算糖化白蛋白比例
七、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案（总HSA定量）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗人血清白蛋白捕获抗体（另一克隆） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清/尿液样品 | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白 | 1:2000-20000稀释，室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加入HRP-链霉亲和素 | 按说明书稀释，室温30分钟 |
| 8 | 洗涤 | 3-5次 |
| 9 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 10 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| ELISA（血清总HSA） | 1:10000-1:100000 | 根据预实验调整 |
| ELISA（尿液微量白蛋白） | 1:10-1:100 | 根据预实验调整 |
| Western Blot | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| 流式细胞术 | 1:500 | 1:200-1:2000 |
| IHC | 1:1000 | 1:500-1:2500 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 纯化人血清白蛋白标准品 | 建立标准曲线 |
| 阴性对照 | 无HSA的缓冲液 | 评估背景 |
| 二抗对照 | 不加一抗，只加BIOTIN-二抗 | 评估非特异性结合 |
| 链霉亲和素对照 | 不加生物素化抗体，只加链霉亲和素 | 评估链霉亲和素非特异性结合 |
4. 重要操作提示
- 本产品为生物素标记抗体，必须与链霉亲和素（SA）检测系统配合使用，不可直接显色。
- 血清中HSA含量极高（约35-55 g/L），检测时必须充分稀释（通常1:10000-1:100000）以避免hook效应（假阴性）。
- 尿液中白蛋白含量较低（微量白蛋白检测），无需过度稀释。
- 生物素-亲和素系统可显著放大信号，适用于低丰度靶标检测（如尿微量白蛋白）。
- 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效 |
九、常见问题
Q1：BIOTIN-小鼠抗人血清白蛋白的主要用途是什么？
A1：主要用于ELISA、Western Blot、IHC、IF等实验中对人血清白蛋白（HSA）的检测。适用于肝功能/肾功能评估、糖尿病糖化白蛋白研究、药物代谢研究、尿微量白蛋白检测等。
Q2：为什么血清HSA检测需要充分稀释？
A2：人血清中HSA浓度极高（约35-55 g/L），在夹心ELISA中，过高浓度的抗原会导致hook效应（高剂量钩状效应），使OD值异常降低，造成假阴性结果。建议从1:10000开始稀释血清样品。
Q3：本产品可以用于检测尿微量白蛋白吗？
A3：可以。本产品的生物素-亲和素信号放大系统可显著提高检测灵敏度，适用于尿液中微量白蛋白（正常<30 mg/24h）的精确定量检测。
Q4：如何确定血清HSA检测的最佳稀释度？
A4：建议通过预实验进行梯度稀释：将正常人血清从1:1000开始倍比稀释至1:1000000，选择OD值在标准曲线线性范围内的稀释度。
Q5：本产品可以用于糖化白蛋白（GA）检测吗？
A5：可以间接使用。GA检测通常需同时测定总白蛋白和糖化白蛋白。本产品可用于总白蛋白定量，配合抗糖化白蛋白特异性抗体，计算糖化白蛋白比例（反映短期血糖水平）。
Q6：产品如何保存？
A6：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为生物素标记的小鼠抗人血清白蛋白抗体，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，适用于ELISA、Western Blot、IHC、IF等多种免疫检测实验，是HSA检测与药物代谢研究的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）